朱俊，汪晨曦

    (上海上药第一生化药业有限公司，上海 200240)

    鞣酸，又称单宁酸，是从植物五倍子中提取的一种多酚类化合物。其含有的大量的酚羟基，可以与蛋白、多肽发生络合形成悬浮液或沉淀。因此在医药领域有广泛应用，如鞣酸软膏、鞣酸蛋白等鞣酸药物以及鞣酸小檗碱、鞣酸加压素等缓释药物。鞣酸含有大量的酚羟基，因此易氧化形成黑色的醌，致使纯度下降直接影响其与蛋白的结合能力，进而影响药品质量[1]。在我司生产鞣酸加压素的过程中，需要鞣酸和多肽加压素进行络合，也出现过络合结果不佳的问题。结合鞣酸本身的特性，我们进一步判断是因为储存不当、时间过长等原因，鞣酸物料发生氧化、受潮等变质问题影响纯度，最终降低产品质量。

    鞣酸纯度的检验较为困难，通常情况下，可直接观察其颜色、性状，但此方法只能简单判断鞣酸的品质，难以确定量化的标准，作用有限。也可采取液相色谱法，但鞣酸摩尔吸光系数过高，同时其含有的酚羟基会与色谱柱发生紧密的结合，从而污染、堵塞、损坏色谱柱，产生极高的成本。紫外标准曲线法可通过鞣酸最大吸收波长(213 nm，276 nm)进行分析，但鞣酸分子所具有的25 个酚羟基易发生氧化，部分氧化后摩尔吸光系数变化极小，紫外法难以区分，故分析结果会偏高而不准确，即鞣酸氧化所导致的纯度降低，无法通过紫外检测确定[2]。因此，我们需要一种精确的、易操作、低成本的方法来检测鞣酸纯度。

    受到鞣酸加压素制备过程形成多肽-鞣酸络合物的启发，我们设计了一种基于蛋白-鞣酸形成络合物的鞣酸纯度检测方法。该络合物在水中形成均匀分散而不沉降的溶液，可以用浊度评价其整个络合体系[3]。在680 nm 波长测定紫外吸收值，建立吸光度-鞣酸浓度的标准曲线，通过标准曲线法测定样品鞣酸的纯 度。

    1 实验部分

    1.1 材料和仪器

    实验所用原料药品、试剂均购买于商业公司，未经说明使用前均不需要二次纯化。所有空气、湿度敏感型反应，都在氩气保护环境下，在烘干的玻璃容器中进行反应。所用的鞣酸标准品、待测样品购于ACROS，糜蛋白酶、胰蛋白酶、缩宫素由上海上药第一生化药业有限公司制备 ......