乔敏莎，郑秋莹，兰为环，张绿茵，唐海，潘晓男，乔晓娜

    (天士力医药集团股份有限公司研究院，天津 300410)

    苯磺酸氯吡格雷(Clopidogrel besilate)是第二代二磷酸腺苷受体拮抗药[1]。目前有文献报道了苯磺酸氯吡格雷的有关物质和溶剂残留研究[2-3]，但对于其遗传毒性杂质研究尚未有报道。近年来，法规对于药物遗传毒性杂质控制的要求越来越严格[4-5]。本文根据2020 年版《中国药典》四部通则〈0512〉、〈0431〉以及人用药品注册技术要求国际协调会(ICH)M7 规定[6-7]，并结合苯磺酸氯吡格雷仿制药生产工艺，建立苯磺酸氯吡格雷中5 种苯磺酸酯类遗传毒性杂质(对硝基苯磺酸、对硝基苯磺酰氯、对硝基苯磺酸甲酯、对硝基苯磺酸乙酯和对硝基苯磺酸异丙酯)的UPLC-MS/MS 检测方法，以期为本品基因毒性杂质质量控制提供方法参考。

    1 实验部分

    1.1 仪器与试剂

    仪器：超高效液相色谱仪，LC 30 AD 型，日本岛津公司；三重四级杆质谱仪，QTrap 5500 型，美国AB Sciex 公司；电子天平，XS105DU 型，瑞士梅特勒-托利多公司。

    试剂：乙腈，质谱级，美国默克公司；纯净水，杭州娃哈哈集团有限公司；标准品：对硝基苯磺酸水合物，纯度83.9%，阿拉丁试剂(上海)有限公司；对硝基苯磺酰氯，纯度98.2%，阿拉丁试剂(上海)有限公司；对硝基苯磺酸甲酯，纯度99.3%，阿拉丁试剂(上海)有限公司；对硝基苯磺酸乙酯，纯度99.5%，自制，批号yz 220813；对硝基苯磺酸异丙酯，纯度99.2%，自制，批号bz 230205；苯磺酸氯吡格雷，自制，批号20210711、20210719、20210720。

    1.2 仪器方法

    色谱方法：色谱柱为沃特世 ACQUITY UPLC HSS T3 色谱柱(10 cm×2.1 mm，1.8 μm)；柱温箱温度30 ℃；样品室温度4 ℃；进样量2 μL；流动相A 为水，流动相B 为乙腈，程序洗脱为：0～ 0.5 min，20%B；0.5～ 1.5 min，20% B～ 65% B；1.5～ 9 min，65% B；9～ 10 min，65% B～ 20% B；10～ 13 min，20% B；流速0.3 mL/min。

    质谱方法：离子源为电喷雾(ESI)源，负离子扫描，多反应监测(MRM)模式，离子化电压(IS)为-4 500 V；雾化温度(TEM)为450 ℃；气帘气(CUR)为35 L/min；雾化器(Gas1)为45 L/ min；辅助加热气为45 L/ min；碰撞气压力(CAD)为medium ......