李瑞洁，何巧玉，张双，4，田介峰，罗学军，旷文静，孙会睿，5，李瑞明，郝士海

    (1.天士力医药集团股份有限公司创新中药关键技术国家重点实验室，天津 300410；2.现代中药创制全国重点实验室，天津 300410；3.中国药科大学，江苏 南京 211198；4.沈阳药科大学，辽宁 沈阳 110016；5.天津中医药大学，天津 301617)

    中药丹参Salviae Miltiorrhizae Radix et Rhizoma是唇形科植物丹参Salvia miltiorrhizaBge.的干燥根和根茎，具有活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈的功效[1]。注射用丹参多酚酸是天津天士力之骄药业有限公司的独家中药保护品种，以丹参中水溶性酚酸类成分为有效成分，对缺血性脑损伤、心肌缺血损伤和糖尿病肾损伤等具有保护作用[2]。目前对于酚酸类化合物的分离，常采用大孔吸附树脂柱[3-4]、超临界流体萃取[5]、高速逆流色谱[6]、硅胶柱层析[7]、ODS 反向色谱[8]、制备型HPLC 等方法进行。而笔者团队在此前对丹参多酚酸化学成分的研究中[9]建立了一套联用反相色谱柱、凝胶柱以及制备液相的酚酸类化合物分离方法，并从中分离得到了异紫草酸，即4-(2-羧基乙烯基)-2-(3，4-二羟基苯基)-2，3-2H-7-羟基-3-苯骈呋喃羧酸-3-[1-羧基-2-(3，4-二羟基)乙基]酯，确定了其立体结构[10]。本实验通过对比MCI-Gel/ LH-20 凝胶/ C18 键合填料柱层析法以及硅胶/ C18 键合硅胶柱层析法两条异紫草酸分离路线的分离效果，意在得到一种操作简便、分离纯度高的异紫草酸分离方法，并进一步研究异紫草酸的药理活性。

    目前普遍认为异紫草酸是丹酚酸B 的降解或转化产物[11-12]，而丹酚酸B 作为丹参中含量较高、抗氧化活性较强的已知成分，被称为天然的抗氧化剂，现广泛用于治疗心脑血管疾病类药物的研究中[13-14]。异紫草酸具有5 个游离酚羟基，具有提供氢质子的能力，从而可以阻断自由基链式反应，即推测其具有清除自由基及抗氧化等作用。本实验通过测定异紫草酸的·OH 和DPPH 清除能力以及还原能力，探究异紫草酸的体外抗氧化活性，为活性丹酚酸类天然抗氧化剂的深入研发提供科学依据。

    1 实验材料

    Buchi 旋转蒸发仪(瑞士 Buchi 公司)；梅特勒 XS205DU 电子天平(托利多仪器有限公司)；Waters UPLC 超高效液相色谱仪(美国 Waters 公司)；Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司)；LC-80 轴向加压制备色谱(法国 Novasep 公司)；Waters Acquity HSS T3(2.1×150 mm ......