GDNF在先天性肺囊性腺瘤样畸形中的表达及其意义
光密度,阳性细胞,1材料和方法,2结果,3讨论
周玲玲,王宗敏,赵志光,王利群(1.温州医学院附属第二医院 病理科,浙江 温州 325027;2.西安市第四医院 病理科,陕西 西安710000)
先天性肺囊性腺瘤样畸形(congenital cysticadenomatoid malformation of lung,CCAM)是一种较少见但严重影响儿童肺组织发育的先天性肺组织畸形。CCAM的确切病因尚不完全清楚,目前国际国内对其临床和影像诊断的报道比较多,而对于其发病机制的研究鲜见报道。本研究通过观察CCAM组织中胶质细胞源性神经营养因子(Glial cell line derived neutrotrophic factor,GDNF)和细胞增殖指数(Ki-67)的表达,从临床病理学和分子生物学角度讨论其在CCAM病理诊断、病理分型及发生、发展过程中的作用及其相关机制。
1 材料和方法
1.1 材料 CCAM组标本为2000-2008年我院及浙江省儿童医院年龄≤15岁CCAM患者(CCAM组)手术切除标本的存档蜡块58例(CCAM I型35例,CCAM I I型15例,CCAM I I I型8例)。同时取同期我院因其他疾病尸检的儿童肺组织10例作为对照组1(CG1组),CCAM囊肿周围相对正常肺组织10例作为对照组2(CG2组)。切片均由主任医师复诊确认。
1.2 试剂 标本用10%中性甲醛固定,常规脱水、石蜡包埋,切片厚度为4 μm。浓缩型兔抗GDNF多克隆抗体购自美国Santa Cruz生物技术公司;免疫组化EliVision法检测试剂盒和DAB显色剂购自福州迈新生物技术开发公司;GDNF原位杂交检测试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司;Ready-touse PCR kit 购自BIO BASIC INC;GDNF mRNA的多相寡核昔酸探针序列为:①5’-CGGGC AGCGG GAAGG CGGAC GCGGT GTGGA-3’;②5’-GCATA TTTGA GTCAC TGCTC AGCGC GAAGG-3’;③5’-TTGGT TTCAT AGCCC AGACC CAAGT CAGTG-3’ ......
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