王丹，姜建斌，陈其，禇茂平，钱燕

    (1.温州医学院附属第一医院 儿科，浙江 温州 325000；2.温州医学院附属育英儿童医院 心血管科，浙江 温州 325000)

    病毒性心肌炎(viral myocarditis，VMC)是儿童心血管系统较为常见的疾病，可造成心源性猝死、心力衰竭，并可进展为心肌病[1]。VMC的发病机制尚不明确。研究发现心肌细胞感染病毒后丝裂原活化的蛋白激酶(mitogen-activated kinase，MAPK)通路活化，推测MAPK通路可能在VMC的发病过程中起重要作用。p38MAPK是新鉴定出的一条丝裂原活化蛋白激酶信号转导蛋白，和病毒复制、心肌肥厚及纤维化等有关[2]。本实验通过建立急性VMC动物模型，观察病毒感染后心肌细胞p38MAPK通路的动态变化及其与VMC的关系。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物 清洁级近交系4～6周龄雄性Balb/C小鼠75只(上海斯莱克实验动物有限责任公司)。

    1.2 实验试剂 CVB3病毒Nancy标准株(山东省医学科学院病毒室)；兔抗鼠磷酸化p38MAPK单克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗(美国CST公司)。

    1.3 模型制作及分组 75只小鼠随机分成2组：心肌炎组60只和对照组15只，定病毒接种日为第0天，心肌炎组小鼠于第0天接种0.1 mL TCID50为10-5.33/mL的CVB3复制心肌炎动物模型[3]，对照组小鼠于相同时间点接种不含病毒液的1640培养液0.1 mL。病毒接种后第1、3、7、14天心肌炎组随机抽取8只小鼠(病程中死亡的小鼠均剔除)，对照组第14天取全部作为总体对照，眼球采血后颈椎脱臼法处死并留取血清及心脏标本，部分心肌组织于-80 ℃超低温冰箱中保存，部分4%中性多聚甲醛固定 ......