娄鹏程，王海萍，李光乾，焦颖，林忠东，叶秀云

    (1.温州医学院附属育英儿童医院 神经内科，浙江 温州 325027；2.浙江中医药大学附属杭州市第六医院、杭州市儿童医院 神经内科，浙江 杭州 310014)

    癫痫持续状态(status epilepticus，SE)可致脑内选择性的神经元缺失、坏死、凋亡，胶质细胞增生及海马硬化[1]；但惊厥性脑损伤的确切机制尚未完全阐明。近年来，随着对SE研究的不断深入，对SE后脑损伤的机制有了进一步的了解。已有研究[2-3]表明内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)参与了SE后脑损伤的过程。而Caspase-12作为ERS凋亡通路中的关键蛋白，在SE后脑损伤中可能起着重要的作用。苄氧羰-丙氨酰-苏氨酸-丙氨酰-天冬氨酰-氟甲基酮(Z-ATAD-FMK)是一种Caspase-12抑制剂，能选择性地阻断Caspase-12的活性，在近几年的离体实验中发现其具有抗凋亡作用，而在活体实验中鲜见报道。本研究于大鼠右侧脑室内注射Z-ATAD-FMK预处理后采用氯化锂-匹罗卡品制作大鼠SE模型，旨在观察抑制Caspase-12后SE大鼠海马Caspase-12蛋白表达的变化，以及对神经元病理学及超微结构的影响。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物和分组 清洁级健康雄性成年SD大鼠80只，体质量250～300 g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司[动物许可证号：SCXK(沪)2007-0005]。室温18～25 ℃，相对湿度70%，人工12 h昼/夜循环照明，全价营养饲料分笼饲养，大鼠能自由摄食及饮水。

    用随机数字表法将大鼠随机分为正常对照组(A组)、二甲基亚砜(DMSO)对照组(B组)、SE组(C组)和Z-ATAD-FMK预处理组(D组)。B组、C组、D组再按大鼠SE后处死时间点不同分为12 h、24 h、72 h组3个亚组，每亚组8只。A组于72 h处死。如果在实验中由于非实验相关因素发生死亡则按各组死亡动物的只数给予补上。

    1.2 实验方法

    1.2.1 侧脑室给药方法：B组、C组、D组的大鼠经10%水合氯醛(按300 mg/kg)麻醉后，俯卧固定于大鼠脑立体定位仪(KOPF 900型，德国KOPF公司)上，将颅顶保持在同一水平面，延颅顶正中将皮肤切开，约开口1～1.5 cm，充分暴露前囟；参照包新民、舒斯云主编的《大鼠脑立体定位图谱》，结合预实验结果确定侧脑室位置，以前囟中央为零点，前囟后-0.8 mm(AP)、中线右侧旁开1.5 mm(LAT)为穿刺点 ......