激光共聚焦显微重建鲜红斑痣三维结构的初步研究
活体,石蜡,三维重建,1材料和方法,2结果,3讨论
田克斌,韩丽林,江银华,周国瑜(1.丽水市人民医院 口腔科,浙江 丽水 323000;2.上海交通大学附属第九人民医院 口腔颌面外科,上海 200011)
光动力治疗和脉冲激光治疗鲜红斑痣要取得好的效果[1-2],必须对病灶的结构有清楚的了解,才能对治疗参数,比如能量、脉宽等做出相应的选择,达到理论上实现对血管的选择性破坏,周围正常组织得到保护。已有文献报道组织铸型、连续切片等技术进行组织的三维结构重建[3-4],但鲜红斑痣常常不是由固定知名血管供血,使组织铸型技术难于实际应用,而连续切片耗时又浪费大量劳力,故也难以广泛应用。本研究通过厚切片、免疫荧光染色、利用“显微CT”[5]激光共聚焦显微镜观察,得到鲜红斑痣三维结构分布图像。
1 材料和方法
1.1 材料 选取我科临床、病理诊断为鲜红斑痣病1例的石蜡包块作标本,共5个石蜡块。患者男性,44岁,标本切取部位为面部,未经过治疗,皮损形态突出皮肤表面,暗红色,病灶压迫可褪色(见图1)。主要仪器:LSM 510 ZEISS 上海第二医科大学激光共焦室。主要试剂:鼠抗人anti-cd34(CHEMICON公司),羊抗鼠FITC标记二抗(长岛公司)。

图1 患者标本切取部位(面部)
1.2 方法
1.2.1 载玻片的处理:将洗净、干燥的载玻片放入以1:10比例去离子水稀释的多聚赖氨酸溶液中,浸泡5 min,室温过夜干燥 ......
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