陈昊，巩文词，陈江，冯娟，吕艳，朱珊丽，陈向敏，薛向阳，张丽芳

    (温州医学院 微生物学与免疫学教研室、分子病毒与免疫研究所，浙江 温州 325035)

    沙眼衣原体主要外膜蛋白多表位免疫血清中和活性分析

    陈昊，巩文词，陈江，冯娟，吕艳，朱珊丽，陈向敏，薛向阳，张丽芳

    (温州医学院 微生物学与免疫学教研室、分子病毒与免疫研究所，浙江 温州 325035)

    目的：制备高效价E型沙眼衣原体(Ct)主要外膜蛋白(MOMP)168多表位特异性免疫血清并研究其免疫学特性。方法：纯化的Trx-his/CtMOMP168融合蛋白经弗氏佐剂乳化后，小鼠背部皮下多点免疫注射，间隔2周后加强免疫，共3次，并分别于免疫前和每次免疫后2周取血，采用ELISA法检测血清融合蛋白和E型Ct全菌体特异性抗体水平及变化趋势，通过体外中和反应检测多表位特异性血清的免疫学特性。结果：小鼠用CtMOMP168多表位融合蛋白全程免疫后产生了抗融合蛋白和E型Ct全菌体特异性抗体，ELISA法检测最高滴度达1:500。ELISA和体外中和实验检测结果显示，该抗体能特异性识别MOMP多表位蛋白和E型Ct全菌体，并能有效抑制E型Ct感染Hela229细胞。结论：沙眼衣原体MOMP多表位融合蛋白免疫血清可特异性结合并中和E型Ct。

    沙眼衣原体；主要外膜蛋白；表位；中和作用

    沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis，Ct)是性传播疾病的主要病原体之一，感染普遍，且可增加HIV的感染概率，与宫颈癌的发生密切相关[1-3]，同时，Ct感染经抗生素治疗后易复发，给Ct的防治带来了困难，而疫苗研制是防治Ct感染的主要途径之一。Ct的主要外膜蛋白(major outer membrane protein，MOMP)占其总外膜蛋白量的60%，可诱导机体产生细胞免疫及包括中和抗体的体液免疫[4]，因而是研究Ct疫苗的主要靶抗原。以抗原表位为基础的疫苗，可同时携带多个目标抗原以及辅助性表位，通过B细胞表位诱导机体产生体液免疫反应，T细胞表位则诱导CTL效应，可达到同时诱导特异的体液免疫和细胞免疫，充分发挥预防控制作用的目的。本研究以前期原核表达的富含多个CTL、Th和B细胞表位的E血清型CtMOMP多表位融合蛋白为基础[4]，免疫小鼠，制备MOMP多表位融合蛋白免疫血清，并对其结合E型Ct全菌体的特异性及其中和活性进行了鉴定，为Ct感染的诊断和预防的进一步研究奠定了实验基础。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物：健康BALB/c小鼠 ......