黄连素对巨噬细胞清道夫受体表达的影响
单核细胞,1材料和方法,2结果,3讨论
黄周青,蔡雪黎,卢中秋,黄伟剑(温州医学院附属第一医院,浙江 温州 325000,1.心血管内科;2.急诊科)
研究证实,氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)是动脉粥样硬化斑块形成的主要危险因子[1],其明显增加单核源巨噬细胞CD36、LOX-1等的表达[2]。巨噬细胞通过清道夫受体如CD36、CD68、LOX-1或SRA等摄取oxLDL[3-6],形成泡沫细胞。脂质负荷的泡沫细胞死亡,形成坏死的富含胆固醇的脂质核心,促进斑块不稳定,导致斑块趋向破裂。斑块破裂后,可释放出斑块脂质核心处的坏死组织,引起血栓形成和随后的动脉闭塞,从而引发急性冠脉事件的发生。可见,斑块内细胞泡沫化程度增加将大大不利于冠心病患者的转归。因此抑制巨噬细胞清道夫受体表达,减少oxLDL摄取,对动脉粥样硬化防治具有重要意义。近年研究发现黄连素(berberine)通过上调低密度脂蛋白(LDL)受体抑制细胞内脂质聚集[7],且增加LXR α-ABCA1通路促进细胞内脂质的溢出[8],提示黄连素在一定程度上可减少细胞泡沫化。但黄连素对巨噬细胞清道夫受体表达的影响尚不明了。因此,本研究从单核细胞向巨噬细胞分化过程及oxLDL刺激巨噬细胞模型分别揭示黄连素对清道夫受体表达的影响。
1 材料和方法
1.1 主要试剂和仪器 RPMI 1640培养基、胎牛血清(FBS)、青霉素/链霉素均购自GIBCO公司;佛波醇(PMA)为Calbiochem(San Diego,CA)产品;黄连素溶于二甲基亚砜(购自Sigma-Aldrich公司);oxLDL购自北京协和医科大学生化室;FITC-CD36(NL07)、PE-CD68抗体(Y1/82A)购自Ebioscience公司;FITC-LOX-1抗体(23C11)为Hycult biotechnology b.v.公司产品;流式细胞仪为BD FACSCalibur产品。
1.2 细胞培养和细胞处理 人单核细胞株(THP-1)来自于ATCC公司(USA)。以5×105/mL密度培养于RPMI 1640+10% FBS+1%青/链霉素培养基中 ......
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