卡托普利对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响
超微结构,1材料和方法,2结果,3讨论
蒋贤忠,赵竞,金可可,李剑敏,赵晨晨,曾玉萍,楼帅,邱晓晓(温州医学院,浙江 温州 325035,1.第一临床医学院;2.病理生理学教研室)
糖尿病心肌病(diabetes cardiomyopathy, DC)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)最常见的并发症之一,可发展为心力衰竭,是导致DM患者死亡的主要原因。研究表明,细胞凋亡参与了DC的发生、发展[1]。血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor,ACEI)能有效逆转DC心脏重构,具有明显的心肌保护作用[2],但其在DC细胞凋亡方面的研究报道较少。本实验以链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立DM大鼠模型,观察ACEI类药物卡托普利(captopril)对DM心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响,并探讨其机制。
1 材料和方法
1.1 实验动物 健康SPF级成年雄性SD大鼠30只,体质量180~220 g,由温州医学院实验动物中心提供,动物许可证号:SYXK(浙2010-0150)。
1.2 主要试剂 卡托普利(规格:25 mg/片)购自常州制药厂;STZ及枸橼酸钠分析纯购自美国Sigma公司;细胞凋亡检测试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司;兔抗鼠Bcl-2、Bax、Caspase-3多克隆抗体及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔二抗购自北京中杉生物技术有限公司;BCA蛋白定量试剂盒购自美国Pierce公司;PVDF膜购自美国Bio-Rad公司;BeyoECL Plus(免疫印迹化学发光试剂盒)购自碧云天生物技术有限公司。
1.3 动物分组及模型建立 健康SPF级成年雄性SD大鼠30只,随机分成正常对照组(NC组)10只和造模组20只。造模组大鼠禁食12 h后,STZ按65 mg/kg剂量腹腔注射 ......
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