干扰素γ对大鼠肺纤维化转录因子GATA3的影响
肺泡,细胞因子,1材料和方法,2结果,3讨论
涂军伟,赵建平,朱景倩,盛琳,章义利(1.金华市中心医院 呼吸科,浙江 金华 321000;2.温州医学院附属第二医院 ICU,浙江 温州325000)
近来有研究表明转录因子GATA3在肺纤维化的发生发展中有重要作用[1]。有研究表明,干扰素γ(IFN-γ)对人和动物的肺纤维化有一定的防治作用,但机制仍不明了。本研究检测大鼠肺纤维化模型外周血单个核细胞(PMBC)GATA3 mRNA的表达,从而探讨IFN-γ干预肺纤维化的机制。
1 材料和方法
1.1 材料 健康雄性SD大鼠70只(由金华市药检所提供),体质量195~305 g,平均(250±50)g;博莱霉素(BLM)A5粉针(哈尔滨博莱制药有限公司,H23021807);IFN-γ针,大鼠干扰素-γELISA Kit(上海晶美生物技术有限公司);宝生物 rTaq酶及配套试剂;GATA3引物及探针均由上海基康公司合成,序列如下:正向引物:5’-CACAGAAGGCAGGGAGTGTGT-3’,反向引物:5’-CAGGCGTTGCAAAGGT AGTG-3’,TaqMan探针:5’-FAM-TACCCCACTGTGGCGGC GAGA-TAMRA-3’,长度均为90 bp。
1.2 方法
1.2.1 模型的建立及分组:雄性SD大鼠随机方法分为正常对照组(C组)10只、BLM组30只、BLMIFN组30只。BLM组以腹腔内给药法复制大鼠肺纤维化模型[1],即每日腹腔内注射15 mg/kg BLM共10 d;对照组每日腹腔内给予0.1 mL/kg 0.9%氯化钠溶液共10 d。BLM组分别于造模的第7天、第14天、第28天各处死10只(相应为BLM1、BLM2、BLM4组);BLM-IFN组在BLM造模后当天开始以IFN-γ肌肉注射,剂量为15万IU·kg-1·d-1,直至实验全程结束,分别在第7天、第14天、第28天各处死大鼠10只(相应为BLM-IFN1、BLM-IFN2、BLM-IFN4组) ......
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