谢爱蓉，吕建新

    (温州医学院 检验医学院，浙江 温州 325035)

    结核病对医务人员的职业危害不可忽视，实验室工作人员结核患病风险为普通人群的7～79倍[1]。抗酸杆菌涂片镜检作为发现传染源、选择化疗方案、考核评价疗效的重要手段，在现代结核病控制工作中占有不可或缺的位置。所以在不影响涂片染色镜检的情况下，将涂片中的分枝杆菌灭活，对于提高基层实验室生物安全有重要意义。本实验利用紫外线照射、次氯酸钠溶液消毒及高压蒸汽灭菌三种方法对痰涂片进行前处理，用以灭活分枝杆菌，观察其效果。

    1 材料和方法

    1.1 材料 73份新鲜抗酸染色阳性痰液由温州市鹿城区人民医院痰检实验室提供。次氯酸钠消毒液、抗酸染色液分别购自杭州西子卫生消毒药械有限公司、杭州嘉伟生物制品有限公司。改良罗氏培养基按照《结核病诊断实验室检验规程》[2]自制。

    1.2 方法

    1.2.1 痰液处理及分组：痰液充分震荡匀化，确保细菌的均匀分布，然后分为四份，分别用于对照组、紫外线照射组、次氯酸钠溶液消毒组及高压蒸汽灭菌组。

    1.2.2 各组处理：

    1.2.2.1 对照组：采用直接涂片方式，取40μL痰液在涂片中央处均匀涂抹成10 mm×20 mm的椭圆形痰膜，制作两张涂片：一张进行抗酸染色，作为镜检对照；一张经火焰固定后刮取痰膜，放入含1 mL 0.9%氯化钠溶液的试管中浸泡，并加入等体积4% H2SO4，强烈振荡，静置20 min后培养。剩余痰液采用分枝杆菌分离培养酸处理方法[2]消化去污，作为培养对照。

    1.2.2.2 紫外线照射组：将涂片置于LABCONCO B2生物安全柜内，用辐照度值为332～360μw/cm2的紫外灯分别垂直照射(距离58 cm)10、20、40、60、80 min后，同火焰固定培养操作处理，刮取痰膜培养。

    1.2.2.3 次氯酸钠溶液消毒组：将痰液分为两小组，向痰液中加入等量有效氯浓度50 g/L次氯酸钠溶液处理10～15 min后 ......