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编号:1429750
利用血清miRNAs表达谱分析荔枝核提取物降低db/db小鼠血糖的可能机制
http://www.100md.com 2013年1月5日 温州医科大学学报 2013年第10期
糖耐量,灌胃,1材料和方法,2结果,3讨论
     张婷,郭景阳,乔敏敏,杨宇,陈琳,李春梅,吕建新

    (温州医科大学 检验医学院生命科学学院,浙江 温州 325035)

    2型糖尿病(T2DM)是由肝脏葡萄糖产生增加、葡萄糖利用异常及胰岛素分泌不足引起的[1],以胰岛素抵抗和胰腺β细胞功能失调为特征的疾病[2]。糖尿病患者在世界范围内正在迅猛增加,2000年全球糖尿病患者总数为1.71亿,预计到2030年将达到3亿以上,其中T2DM约占90%[3]。2004年统计显示,我国糖尿病人数约4000万,但是根据2009年最新公布的数据显示,我国糖尿病患者已经达到9400万[4],说明实际糖尿病发病率增长将比预计高出很多。因此,目前迫切需要安全无不良反应,能防治糖尿病尤其是T2DM的药物。

    有研究显示,从荔枝中提取的小分子多酚在体内和体外均可诱导一些改变,如抗肿瘤细胞凋亡[5]、对小鼠的抗氧化和抗感染作用[6]、对运动员的抗疲劳作用[7]。越来越多的研究[8-9]显示,荔枝核提取物有调节血糖、改善糖尿病糖脂代谢紊乱和预防糖尿病并发症发生的作用。但是对于荔枝核对T2DM降糖作用的分子机制我们目前还不清楚。microRNAs(miRNAs)是一种小的内源性非编码RNA分子,这些小的miRNA通常靶向一个或者多个mRNA,可以有效地降低靶mRNA的水平,在基因表达调控中起到重要的作用,当然,miRNA本身的表达也受到严格的调控。大量研究已经证实,miRNAs与胰岛素抵抗的形成密切相关。因此,我们通过追踪检测T2DM的理想模型db/db小鼠的体质量、摄食量、饮水量、空腹血糖、糖耐量和胰岛素耐量的变化,并通过血清miRNAs芯片和Real-time PCR技术,初步研究荔枝核降低db/db小鼠血糖的可能机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料 荔枝核提取物50 g,由南京中医药大学植物药研究与新药开发中心暨南京植物药深加工工程研究中心提供;血糖仪和血糖试纸;胰岛素;50%葡萄糖溶液;RNA提取试剂盒(QIAGEN);大鼠胰岛素ELISA试剂盒购自上海西塘生物科技有限公司;逆转录试剂盒和PCR试剂盒均购自大连Takara公司;db/db小鼠由南京大学模式动物研究所提供,C57BL/6小鼠由温州医科大学实验动物中心提供。

    1.2 方法

    1.2.1 动物分组及给药方案:实验于温州医科大学实验动物中心完成。SPF级db/db小鼠8只和C57BL/6小鼠3只,雄性,鼠龄2个月左右,普通饮食,自由饮水。将小鼠分为3组:荔枝核处理组(db/db小鼠5只),未处理组(db/db小鼠3只)和正常对照组(C57BL/6小鼠3只) ......

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