池闯， 刘瑜， 林晓铭， 孙成超

    (温州医科大学附属第一医院 心胸外科，浙江 温州 325000)

    昼夜节律生物钟普遍存在于生物界，机体的生理、生化、行为过程中都表现出一定的昼夜节律变化，昼夜节律生物钟的紊乱可能导致肿瘤的发生。流行病学研究[1-2]表明，长期夜班女性患乳腺癌的概率明显高于正常上班人群，而长期夜班男性人群易患前列腺癌。Per2作为生物钟基因中的关键组成部分，亦可能与肿瘤的发生、发展有关，在胰腺癌、神经胶质瘤等[3-4]恶性肿瘤中均存在Per2表达的降低或缺失。我们采用免疫组织化学染色法检测非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer，NSCLC)组织中Per2的表达，探讨其在 NSCLC发生、发展和转移过程中的作用及其与预后的关系。

    1 资料和方法

    1.1 一般资料 选取2005年1月到2006年12月在温州医科大学附属第一医院心胸外科手术治疗的NSCLC病例60例，其中男38例，女22例，年龄38～77岁，≤60岁的27例，>60岁的33例。有吸烟史37例，无吸烟史23例；中央型24例，周围型36例；鳞癌28例，腺癌32例；高、中分化34例，低分化26例；I期14例，II期28例，III期18例；有淋巴结转移26例，无淋巴结转移34例。另选取同期肺大疱及肺囊肿手术中切除的正常肺组织共20例作为对照。随访日期以患者手术日起计算，截至2009年12月或患者死亡日期。

    1.2 方法 鼠抗人Per2(M01)单克隆抗体购自ABNOVA公司；免疫组织化学SP试剂盒及其他试剂

    均购自北京中杉金桥公司。组织蜡块4μm连续切片，二甲苯脱蜡，无水乙醇逐步水化，抗原修复，SP法免疫组织化学染色，严格按试剂说明书进行。以PBS缓冲液替代一抗作为阴性对照。Per2染色以细胞核或细胞质出现黄色或棕褐色颗粒为阳性。高倍镜下随机选10个视野，各计数100个细胞，无阳性细胞为0分，阳性细胞1%～25%为1分 ......