李春梅，郑超，乔敏敏，吕建新，李伟

    (1.温州医科大学 检验医学院、生命科学学院，浙江省医学遗传学重点实验室，浙江 温州325035；2.温州医科大学附属第二医院 内分泌科，浙江 温州 325027)

    ·论 著·

    血清miR-146a/b实时荧光定量分析及其作为分子标志物的初步评价

    李春梅1，郑超2，乔敏敏1，吕建新1，李伟1

    (1.温州医科大学 检验医学院、生命科学学院，浙江省医学遗传学重点实验室，浙江 温州325035；2.温州医科大学附属第二医院 内分泌科，浙江 温州 325027)

    目的：以特异性调节Toll样受体信号通路的miR-146a/b为检测靶标，建立血清miRNAs分子荧光定量检测方法，并对其作为血清炎症分子标志物的潜在价值进行初步评价。方法：采集正常体质量儿童血清20例(对照组)、超重儿童血清20例(超重组)、肥胖儿童血清20例(肥胖组)及健康成年人血清50例(健康成人组)，酚-氯仿法提取血清总RNAs，SYBR Green实时荧光定量技术定量检测血清中miR-146a/ b拷贝数， Graphpad Prism5.0软件进行统计分析并绘图。结果：对照组血清中miR-146a的拷贝数显著低于超重组(P=0.0061)和肥胖组(P=0.0262)，超重组和肥胖组之间差异无统计学意义(P=0.0656)。miR-146a表达量的受试者工作特征曲线下面积(AUC)分析显示：对照组vs超重组AUC=0.8475，P=0.0002；对照组vs肥胖组AUC=0.6050，P=0.2560；超重组vs肥胖组AUC=0.5475，P=0.6073。miR-146b与miR-146a呈不同表达趋势，超重组儿童血清miR-146b拷贝数显著高于对照组(P=0.0090)和肥胖组儿童(P=0.0023)，肥胖组儿童血清中miR-146b的拷贝数均值虽略低于对照组，但差异无统计学意义(P=0.1556)。miR-146b表达量的AUC分析显示：正常组vs超重组AUC=0.7425，P=0.0087；正常组vs肥胖组AUC=0.6325，P=0.1517；超重组vs肥胖组AUC=0.7825，P=0.0023。miR-146a/b拷贝数值变异系数(CV)大：对照组、超重组和肥胖组儿童血清中miR-146a拷贝数的CV值分别为80.94%、110.94%、175.88%；miR-146b拷贝数的CV值分别为164.11%、189.72%、152.00%。在健康成人血清中miR-146a/b呈现相近表达模式 ......