miR-34c对I I型子宫内膜癌HEC-1-B细胞生长和凋亡的影响
癌基因,试剂,克隆,1材料和方法,2结果,3讨论
李甫钥,薛纪森,黄亦波,陈慧君,郑飞云(温州医科大学附属第一医院 妇科,浙江 温州 325015)
·论 著·
miR-34c对I I型子宫内膜癌HEC-1-B细胞生长和凋亡的影响
李甫钥,薛纪森,黄亦波,陈慧君,郑飞云
(温州医科大学附属第一医院 妇科,浙江 温州 325015)
目的:研究miR-34c对Ⅱ型子宫内膜癌HEC-1-B细胞的生长及凋亡的影响。方法:用hsa-miR-34c mimics转染HEC-1-B细胞。流式细胞技术测定细胞转染率,实时荧光定量PCR验证转染后miR-34c的表达。CCK-8检测细胞增殖能力的改变。细胞克隆形成实验观察miR-34c对细胞生长的长期抑制。流式细胞技术测细胞凋亡。结果:细胞转染率为81.16%。相对于对照组,转染后实验组miR-34c表达明显增加,细胞增殖、克隆形成能力减弱,凋亡增加(P<0.05)。结论:miR-34c能明显抑制Ⅱ型子宫内膜癌细胞的增殖,促进细胞凋亡,是Ⅱ型子宫内膜癌的潜在抑癌基因。
miR-34c;Ⅱ型子宫内膜肿瘤;细胞;增殖;凋亡
子宫内膜癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和病死率正逐年上升[1-2]。手术是目前子宫内膜癌的主要治疗方法。根据组织学特征、生物学表现及临床预后等,子宫内膜癌分为I型和I I型两种类型[3]。I型子宫内膜癌为雌激素受体阳性的高分化子宫内膜样腺癌,占子宫内膜癌的80%左右,一般预后较好;I I型为雌激素受体阴性的子宫内膜癌,较少见,主要包括浆液性腺癌、透明细胞癌及其他低分化癌[4],分化较差,预后不良。因此,寻找新的治疗方法对于改善I I型子宫内膜癌的预后具有重大意义。微RNA(miRNA)是一种长约18~24个核苷酸的非编码小RNA,通过对mRNA剪切或翻译抑制来调节基因表达[5]。最近研究发现miRNA可作为癌基因或抑癌基因参与多种癌的发生和发展(包括胃癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、宫颈癌、淋巴瘤等)[6]。miRNA为肿瘤的治疗提供了新的思路,并可能在分子水平对未来肿瘤治疗产生巨大的影响。我们以前的研究[7]通过基因芯片技术对子宫内膜癌miRNA表达谱进行分析发现相对于正常子宫内膜,miR-34c在I I型子宫内膜癌中呈明显低表达,提示miR-34c可能是I I型子宫内膜癌的抑癌基因之一。本研究通过上调I I型子宫内膜癌细胞的miR-34c表达并对其生物学功能的改变进行检测,从而进一步了解miR-34c在I I型子宫内膜癌发生发展中的作用。
1 材料和方法 ......
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