刘云霄，潘晓琼，胡臻

    (温州医科大学附属第二医院 中医科，浙江 温州 325027)

    二氢杨梅素对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的影响

    刘云霄，潘晓琼，胡臻

    (温州医科大学附属第二医院 中医科，浙江 温州 325027)

    目的：研究二氢杨梅素(DMY)对过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响并探讨其作用机制。方法：用不同浓度DMY(5μ g·mL-1，20μ g·mL-1，80μ g·mL-1)预处理保护HUVECs 12 h，再用0.5 mmol·L-1H2O2干预12 h，用MTT法检测细胞活力；用Hoechst33258进行细胞核染色；并取上清液检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量；用流式细胞仪分别测活性氧(ROS)和细胞内钙离子含量。结果：DMY能明显提高H2O2(0.5 mmol·L-1)损伤后HUVECs存活率(P<0.05)，增加上清液SOD活性，降低MDA含量，减少细胞内ROS表达，下调细胞内钙离子浓度，其中DMY 5 μg·mL-1时效果最明显。结论：DMY对H2O2诱导内皮细胞损伤具有保护作用，其机制与清除细胞内ROS，抑制细胞内钙离子介导的细胞凋亡相关，浓度以DMY 5 μg·mL-1时效果最明显。

    二氢杨梅素；内皮细胞；超氧化物歧化酶；丙二醛；活性氧；细胞内钙离子

    藤茶作为一种民间古茶，可追溯至东晋时期[1]。目前，在我国广大农村，甚至在东南亚各国也享有盛誉。民间主要用以治疗糖尿病等多种疾病。现代研究表明，藤茶中主要含有黄酮类成分，以二氢杨梅素(dihydromyricetin，DMY)含量最高，具有消炎抗菌、抗肿瘤[2]、抗氧化[3]、保肝[4]、护胃[5]、降血糖[6]等作用。糖尿病以高血糖为主要特征，逐渐损伤血管和器官，最终出现威胁生命的并发症。在这些并发症的病理生理中，微小血管的改变起到十分重要的作用[7]。以往动物实验证实DMY具有降血糖、抗氧化作用，但缺乏对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVECs)的研究报道。本实验以体外培养HUVECs为基础，通过观察DMY对过氧化氢(H2O2)诱导的HUVECs损伤的作用，明确DMY对糖尿病血管内皮细胞的影响，并初步探讨其机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞和试剂：HUVECs由中国科学院细胞库提供。胎牛血清、PRMI1640培养液、0.25%胰酶-EDTA为Gibco公司产品 ......