刘云霄，潘晓琼，胡臻

    (温州医科大学附属第二医院 中医科，浙江 温州 325027)

    藤茶作为一种民间古茶，可追溯至东晋时期[1]。目前，在我国广大农村，甚至在东南亚各国也享有盛誉。民间主要用以治疗糖尿病等多种疾病。现代研究表明，藤茶中主要含有黄酮类成分，以二氢杨梅素(dihydromyricetin，DMY)含量最高，具有消炎抗菌、抗肿瘤[2]、抗氧化[3]、保肝[4]、护胃[5]、降血糖[6]等作用。糖尿病以高血糖为主要特征，逐渐损伤血管和器官，最终出现威胁生命的并发症。在这些并发症的病理生理中，微小血管的改变起到十分重要的作用[7]。以往动物实验证实DMY具有降血糖、抗氧化作用，但缺乏对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVECs)的研究报道。本实验以体外培养HUVECs为基础，通过观察DMY对过氧化氢(H2O2)诱导的HUVECs损伤的作用，明确DMY对糖尿病血管内皮细胞的影响，并初步探讨其机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞和试剂：HUVECs由中国科学院细胞库提供。胎牛血清、PRMI1640培养液、0.25%胰酶-EDTA为Gibco公司产品，青/链霉素、活性氧(ROS)、细胞内钙离子(Ca2+)、细胞凋亡-Hoechst33258染色试剂盒购于碧云天，MTT为sigma公司产品，DMY购于成都曼思特公司，D-葡萄糖为biosharp公司产品，超氧化物歧化酶(SOD)测试盒、微量丙二醛(MDA)测试盒购于南京建成。

    1.1.2 仪器：CO2细胞培养箱，多功能酶标仪，细胞工作超净台，低速离心机，倒置显微镜，流式细胞仪。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞株的培养：HUVECs复苏后，用含有10%胎牛血清的1640培养液置于37 ℃、5% CO2、相对湿度为95%培养箱里培养，隔天传代。取对数生长期的细胞用于本次实验研究。

    1.2.2 实验分组：用不同浓度DMY(5μg·mL-1，20μg·mL-1，80μg·mL-1)预处理保护HUVECs 12 h，分别为DMY低、中、高剂量组 ......