叶辉，应小明，马江林，童夏生，赵蓓

    (1.温州医科大学附属黄岩医院 儿科，浙江 台州 318020；2.台州市中西医结合医院 儿科，浙江台州 317523)

    哮喘是一种气道慢性炎症性疾病，由多种炎症细胞和炎症组分参与，其中包括中性粒细胞(PMN)及其分泌产物。PMN在哮喘急性发作时被激活，分泌多种酶、炎症递质和细胞因子等，共同参与哮喘的炎症过程[1]。研究发现，炎症因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、转化生长因子(TGF-β1)在哮喘的气道炎症和气道重构中起着重要作用[2-3]。本实验通过制备哮喘动物模型，检测iNOS、TGF-β1在PMN中的表达水平，探讨PMN参与哮喘发病的可能机制。

    1 材料和方法

    1.1 试剂 卵白蛋白(OVA)和Histopaque 1119、Histopaque 1083分离液购自美国Sigma公司，山羊抗大鼠iNOS一抗免疫组织化学试剂盒购自美国Santa Cruz公司，小鼠抗大鼠TGF-β1单克隆抗体购自英国Abcam公司，兔抗山羊二抗试剂盒购自上海晶美公司。

    1.2 实验动物及分组 SPF级健康雄性SD大鼠20只，6～8周龄，体质量(234±19)g，由温州医科大学实验动物中心提供[动物批号：SCXK(浙)2005-0019]，在SPF级环境中饲养。随机分成哮喘组和对照组，每组10只。

    1.3 模型的复制 参照文献[4]，于实验开始第1天和第8天分别腹腔注射OVA/Al(OH)3混合液1 mL[内含OVA 1 mg和Al(OH)3100 mg]致敏；第15天开始使用空气压缩雾化器(由德国百瑞公司生产)向置于密闭有机玻璃容器内的大鼠喷雾1% OVA，每天吸入30 min，连续激发7 d。哮喘大鼠表现为烦躁不安、瘙痒、喘鸣、腹肌抽搐等症状。对照组致敏和激发均以0.9%氯化钠溶液替代OVA/Al(OH)3混合液和OVA溶液 ......