林海霞，苏震，舒丹桦，何立梅

    (温州医科大学附属第一医院 肾内科，浙江 温州 325015)

    ·论 著·

    microRNA-494对大鼠肾间质成纤维细胞分泌细胞外基质的调控作用

    林海霞，苏震，舒丹桦，何立梅

    (温州医科大学附属第一医院 肾内科，浙江 温州 325015)

    目的：探讨microRNA-494(miR-494)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F)细胞外基质分泌的调控作用。方法：体外培养NRK-49F细胞株，并分为以下6组：TGF-β1(3 ng/mL)组、miR-494模拟物(50 ng/mL)组、miR-494抑制物(50 ng/mL)组、miR-494模拟物(50 ng/mL)+TGF-β1(3 ng/mL)组、miR-494抑制物(50 ng/mL)+TGF-β1(3 ng/mL)组、空白对照组。茎环实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞miR-494、胶原蛋白I(Col I)、纤维连接蛋白(FN)mRNA；Western Blot法检测细胞Col I蛋白。结果：与空白对照组比较，TGF-β1组miR-494(P<0.01)、Col I mRNA(P<0.05)及FN(P<0.01)mRNA表达显著升高；miR-494模拟物组Col I、FN mRNA表达显著升高(P<0.05)；miR-494抑制物组Col I(P<0.05)、FN(P<0.01)mRNA表达显著降低。与TGF-β1组比较，miR-494模拟物+TGF-β1组Col I、FN mRNA表达显著升高(P<0.05)；miR-494抑制物+TGF-β1组Col I、FN mRNA表达显著降低(P<0.05)。各组间Col I蛋白与Col I mRNA的表达水平相一致。结论：miR-494可能参与调控并促进TGF-β1诱导肾间质成纤维细胞的细胞外基质分泌。

    肾间质纤维化；microRNA-494；转化生长因子-β1

    肾间质纤维化是慢性肾脏疾病(chronic kidney disease，CKD)进入终末期肾脏疾病(end-stage renal disease，ESRD)的常见原因之一，其主要分子机制是肾间质成纤维细胞(NRK-49F)激活成肌成纤维细胞，并促进细胞外基质分泌和沉积。转化生长因子(transforming growth factor，TGF)β 1被认为是促进肾间质纤维化的重要细胞因子之一[1]，它可促进肾间质成纤维细胞的激活并转化成肌成纤维细胞 ......