EIF5A2在结直肠癌细胞中的表达及在5-Fu化疗抵抗中的作用
细胞系,抑制率,1材料和方法,2结果,3讨论
范永胂,畅银娟(1.浙江医院 肛肠科,浙江 杭州 310013;2.浙江大学附属妇产科医院 妇科,浙江 杭州 310000)
·基 础 研 究·
EIF5A2在结直肠癌细胞中的表达及在5-Fu化疗抵抗中的作用
范永胂1,畅银娟2
(1.浙江医院 肛肠科,浙江 杭州 310013;2.浙江大学附属妇产科医院 妇科,浙江 杭州 310000)
目的:探讨EIF5A2在结直肠癌细胞中的表达及在化疗抵抗中的作用。方法:培养对数生长期的人结直肠癌细胞系LOVO、SW480及DLD1,用Western blot法测定三种结直肠癌细胞系中EIF5A2的表达。将人结直肠癌LOVO细胞在浓度为0.2 μg/L的5-Fu中培养48 h,用Western blot法测定EIF5A2的表达。EIF5A2-siRNA转染LOVO细胞,将转染后的LOVO细胞及结直肠癌LOVO细胞在0.2 μg/L的5-Fu中培养48 h,用MTT法测定细胞生长抑制率。结果:EIF5A2在三种结直肠癌细胞系中均有表达,在LOVO细胞中表达量最高(P<0.05)。结直肠癌LOVO细胞在5-Fu中培养48 h后 EIF5A2表达明显增强(P<0.05)。EIF-5A2-siRNA转染LOVO细胞后增加了5-Fu的细胞抑制率(P<0.05)。结论:EIF5A2在人结直肠癌细胞中有表达,并且增强了5-Fu的化疗抵抗力。
结直肠肿瘤;EIF5A2;5-氟尿嘧啶;化疗抵抗
结直肠癌是导致癌症相关死亡的最常见病因,每年约有超过1千万人罹患此病[1]。5-Fu联合其他药物化疗可以显著提高患者生存率[2],然而化疗抵抗给结直肠癌的治疗带来了巨大挑战。EIF5A2(eukaryotic translation initiation factor 5A2)是一种真核生物翻译起始因子,是Guan等[3]从卵巢癌中分离出的一种原癌基因。研究表明EIF5A2蛋白的高表达与结直肠癌血管淋巴管浸润、较晚的分期和肿瘤远处转移有关[4],是预后不良的独立危险因素[5]。但EIF5A2和化疗抵抗的关系及其机制目前研究较少,所以在本实验中,我们将检测EIF5A2在三种不同的结直肠癌细胞系中的表达情况,并初步探讨EIF5A2在5-Fu化疗抵抗中的作用。
1 材料和方法
1.1 材料 人结直肠癌细胞系LOVO、SW480、DLD1由本院实验室保存。RPMI 1640培养基、胎牛血清(FBS)购自GIBCO公司。抗EIF5A2抗体、EIF5A2-siRNA购自武汉晶赛公司 ......
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