柚皮素对RSV A2株感染引起气道黏液高分泌的抑制作用
培养液,1材料和方法,2结果,3讨论
孟珊珊,吕芳芳,胡晓光,张海邻,李昌崇(1.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 儿童呼吸科,浙江 温州 325027;2.邹城市人民医院儿科,山东 济宁 273500)
·论 著·
柚皮素对RSV A2株感染引起气道黏液高分泌的抑制作用
孟珊珊1,2,吕芳芳1,胡晓光1,张海邻1,李昌崇1
(1.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 儿童呼吸科,浙江 温州 325027;2.邹城市人民医院儿科,山东 济宁 273500)
目的:探讨柚皮素(Nar)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起的气道黏液高分泌的作用。方法:通过RSV A2株感染人肺腺癌上皮细胞构建气道黏液高分泌细胞模型,在RSV感染及Nar干预作用下,采用实时荧光定量PCR、ELISA和细胞免疫荧光技术检测各组细胞黏蛋白(MUC)5AC的表达情况。结果:RSV感染R1组[感染复数(MOI)=0.5]、R2组(MOI=1.0)、R3组(MOI=5.0)和对照组(C组)MUC5AC mRNA相对表达量分别为1.45±0.10、2.67±0.09、4.82±0.27和1,各组MUC5AC蛋白的表达量分别为(38.61±0.41)μg/L、(44.11± 0.96)μg/L、(51.01±0.48)μg/L和(34.38±0.95)μg/L,RSV感染组和C组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。R2组和不同浓度Nar干预组N1组(Nar 30 μmol/L+RSV MOI=1.0)、N2组(Nar 100 μmol/L+RSV MOI=1.0)、N3组(Nar 30 μmol/L)、N4组(Nar 100 μmol/L)及DMSO组(D组)的MUC5AC mRNA水平依次为2.52±0.10、2.31±0.06、1.90±0.01、0.99±0.04、0.85±0.03、1.20±0.03,MUC5AC蛋白水平依次为(46.72±0.87)μg/L、(43.60±0.45)μg/L、(40.55±0.45)μg/L、(38.73±0.55)μg/L、(37.08±1.35)μg/L、(37.12±0.91)μg/L,C组MUC5AC蛋白水平为(37.62±1.18)μg/L,与C组相比,R2组MUC5AC mRNA和蛋白水平显著增加(P<0.05),N1、N2组与R2组相比,MUC5AC mRNA和蛋白水平显著降低,随Nar浓度增加,抑制效果更明显,呈剂量相关性(P<0.05),N3、N4组与C组相比,MUC5AC mRNA和蛋白表达水平下降 ......
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