彭武建，王红蕾，黄建溶，戴勇(.深圳市第三人民医院 肾内科，广东 深圳 58000；.南方医科大学附属第三医院 肾内科，广东广州 50000；.暨南大学第二临床医学院 深圳市人民医院 临床医学研究中心，广东 深圳 5800)

    类风湿性关节炎患者循环microRNAs生物标志物的筛选及鉴定

    彭武建1，王红蕾2，黄建溶1，戴勇3

    (1.深圳市第三人民医院 肾内科，广东 深圳 518000；2.南方医科大学附属第三医院 肾内科，广东广州 510000；3.暨南大学第二临床医学院 深圳市人民医院 临床医学研究中心，广东 深圳 518020)

    [摘 要]目的：分析类风湿性关节炎(RA)患者血浆中差异表达的microRNAs(miRNAs)。方法：采用miRNA芯片检测、筛选RA患者与正常人血浆中表达有显著变化的miRNAs，并采用RT-qPCR技术对芯片数据进行验证。数据处理采用GeneSpring GX软件，t检验和方差分析用于统计学分析。结果：RA患者与正常人间存在差异的循环miRNAs共有40个，其中18个上调，22个下调。根据循环miRNAs在芯片中表达差异的倍数和潜在的生物学价值，选取4个miRNAs进行RT-qPCR验证，候选的miRNAs与正常对照间差异有统计学意义(P<0.05)，证实芯片结果可靠性。结论：RA患者体内具有差异表达的循环miRNAs，这些循环miRNAs可作为一种潜在的RA候选生物标志物。

    [关键词]类风湿性关节炎；微小RNA；芯片；生物标志物

    类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种以外周滑膜关节慢性炎性病变、关节软骨和骨质进行性不可逆性破坏为特征的全身性自身免疫性疾病[1]。目前RA的诊断采用1987年美国风湿病学会(ACR)修订的诊断分类标准[2]，符合此标准的患者常已出现严重的关节破坏，不利于RA的早期诊断。因此，寻找RA特异性的疾病诊断生物标志物尤为重要。

    微小RNA(microRNAs，miRNAs)是一类长约18～25 nt的内源性非编码RNA，在转录后水平调控基因的表达[3]。miRNAs参与免疫功能调节过程及自身免疫性疾病的发生与进展[4-6]。在循环系统中同样可以检测到miRNAs的存在，且血清/血浆中miRNAs在不同的疾病状态下存在着差异表达，可作为一类具有潜在价值的用于临床的生物标志物[7-8]。因此，本研究应用miRNA基因芯片检测RA患者与正常对照组的循环miRNAs表达谱，分析2组间差异表达miRNAs ......