段志良，李德周，徐娟娟，贾庆军，刘慧芳，陈柏坤，文金生

    (1.温州医科大学附属第二医院 医学检验中心，浙江 温州 325027；2.宁波市第二医院 肝病科，浙江 宁波 315000；3.温州医科大学 虫媒病毒研究所，浙江 温州 325035)

    登革病毒HLA-A*0201限制性T细胞表位诱导免疫反应的研究

    段志良1，李德周2，徐娟娟3，贾庆军3，刘慧芳3，陈柏坤3，文金生3

    (1.温州医科大学附属第二医院医学检验中心，浙江温州325027；2.宁波市第二医院肝病科，浙江宁波315000；3.温州医科大学虫媒病毒研究所，浙江温州325035)

    目的：探讨登革病毒(DENV)HLA-A*0201限制性T细胞表位诱导DENV血清型间交叉反应性T细胞的效应。方法：基于已鉴定DENV-1中HLA-A*0201限制性CD8+T细胞表位(NS4b40-48TLYAVATTI)序列，合成在其他血清型中相似的候选表位，采用MHC-肽复合物稳定性实验检测候选表位与HLA-A*0201结合力。采用酶联免疫斑点(ELISPOT)实验研究已鉴定表位及候选表位免疫HLA-A*0201转基因小鼠产生的CD8+T细胞识别相同及相似表位能力；采用ELISPOT实验研究不同DENV血清型感染HLA-A*0201转基因小鼠是否产生能识别已鉴定表位及候选表位的T细胞反应。结果：DENV-3中NS4b39-47TLYAVATTV与HLA-A*0201具高结合力，但DENV-2 中NS4b39-47TLYAVATTF与HLA-A*0201结合力弱。DENV-1-NS4b40-48和DENV-3-NS4b39-47免疫的转基因小鼠脾、淋巴结和外周血中存在可识别DENV-1-NS4b40-48、DENV-2-NS4b39-47和DENV-3-NS4b39-47的交叉反应性CD8+T细胞。在DENV-1，-2，-3感染的转基因小鼠体内也存在类似的T细胞反应。结论：DENV-3中NS4b39-47TLYAVATTV为新的CD8+T细胞表位，该表位及已报道表位NS4b40-48TLYAVATTI均可诱导DENV血清型间交叉反应性CD8+T细胞反应，二者有助于我们研究DENV血清型间交叉反应性CD8+T细胞的功能以及用于评估DENV候选疫苗的T细胞免疫效应。

    登革病毒；HLA-A*0201；交叉反应性；CD8+T细胞

    登革病毒(dengue virus，DENV)包括4个血清型(DENV-1，-2，-3，-4)，其翻译3个结构蛋白(C、PrM/M、E)和7个非结构蛋白(NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B、NS5) ......