陈新宇，段志良，江明华，贾庆军，徐娟娟，陈柏坤，文金生，

    (1.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 检验科，浙江 温州 325027；2.温州医科大学 基础医学院虫媒病毒研究所，浙江 温州 325035)

    登革病毒高度保守的HLA-A*1101限制性T细胞表位鉴定和体内免疫反应研究

    陈新宇1，段志良1，江明华1，贾庆军2，徐娟娟2，陈柏坤2，文金生1，2

    (1.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院 检验科，浙江 温州 325027；2.温州医科大学 基础医学院虫媒病毒研究所，浙江 温州 325035)

    目的：鉴定登革病毒2型(DENV-2)HLA-A*1101限制性T细胞表位并探讨其诱导的T细胞反应的特征。方法：基于DENV-2的氨基酸序列，采用T细胞表位预测软件预测HLA-A*1101限制性候选T细胞表位；基于HLA-A*1101转基因小鼠，采用ELISPOT实验、ELISA实验和CD8+T细胞(CTL)杀伤实验研究候选表位的HLAA*1101限制性和所诱导的T细胞反应的特征。结果：在合成的14条候选表位中，9条肽(NS1161-170、NS1263-272、NS36-15、NS4b44-53、NS333-42、C58-67、E30-38、NS3576-584和NS4a72-80)免疫HLA-A*1101转基因小鼠可诱导产生肽特异性分泌IFN-γ的T细胞。除了分泌IFN-γ，C58-67和NS3576-584特异性T细胞也可分泌TNF-α，而E30-38特异性T细胞更可同时分泌TNF-α和IL-6。DENV-2感染的HLA-A*1101转基因小鼠体内也可检测到针对NS4b44-53、NS333-42、C58-67、E30-38、NS3576-584和NS4a72-80的分泌IFN-γ的T细胞。采用上述6条肽的混合物免疫HLA-A*1101转基因小鼠所诱导的效应细胞可显著杀伤DENV-2感染的小鼠脾单核细胞。结论：本研究鉴定出了9条全新的DENV-2特异性HLA-A*1101限制性T细胞表位。

    登革病毒；HLA-A*1101；表位/肽；转基因小鼠

    登革病毒(dengue virus，DENV)感染常引起自限性登革热(dengue fever，DF)，也可导致致死性登革出血热(dengue hemorrhagic fever，DHF)/登革休克综合症(dengue shock syndrome，DSS)。每年约有3.9亿人感染DENV，包括约1亿DF患者，50万DHF和(或)DSS，2万死亡病例[1-2] ......