方煊，李雅丽，陈新梅

    (1.绍兴第二医院 普外科，浙江 绍兴 312000；2.新疆医科大学附属第一医院 VIP内科，新疆 乌鲁 木齐 830054；3.山东中医药大学 药学院，山东 济南 250355)

    雪菊黄酮对脂肪变肝细胞的降脂效果

    方煊1，李雅丽2，陈新梅3

    (1.绍兴第二医院 普外科，浙江 绍兴 312000；2.新疆医科大学附属第一医院 VIP内科，新疆 乌鲁 木齐 830054；3.山东中医药大学 药学院，山东 济南 250355)

    目的：研究雪菊黄酮对发生脂肪变的正常人肝细胞系L-02的影响。方法：医用脂肪乳注射液制备人肝L-02细胞的高脂细胞模型。以不同浓度(20、50、100 μmol/L)的雪菊黄酮进行共培养，分别孵育高脂变性的肝细胞不同时间(3、12、24、48 h)后，用油红脂肪染色法观察细胞脂滴形成情况。检测细胞培养上清内的酶学指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)及甘油三酯(TG)的含量。结果：医用脂肪乳培育人肝L-02细胞脂肪变性模型可行。高浓度的雪菊黄酮(100 μmol/L)培养后高脂肝细胞胞浆内脂滴明显减少，TG含量降低。不同孵育时间培育(3、12、24、48 h)后，TG含量随培育时间延长而逐步降低。结论：雪菊黄酮能降低脂肪变性肝细胞中TG的含量，作用效果与雪菊黄酮的作用浓度和培育时间相关，未见明显肝细胞酶学损害。

    雪菊；黄酮；甘油三酯；高脂细胞模型

    本课题组前期进行了雪菊黄酮的制备、成分分离鉴定和分析工作，并进行了小鼠调脂作用分析[1]，初步证明雪菊黄酮具有降低小鼠血脂的作用，其作用机制尚不清楚。前期研究主要采用的是动物模型，存在个体差异较大、实验条件不好控制、周期较长、材料耗费较多等缺点。而细胞模型实验不仅能针对性地研究细胞水平的脂肪肝发病机制，并且能精确控制用药浓度，研究分子作用机制，有效地缩短筛选治疗药物的进程，有助于筛选大量的药物。本研究采用脂肪乳作用于在体外培养的人正常肝细胞L-02细胞株的方式，建立脂肪肝的体外模型，结合油红O染色观察细胞内脂肪滴变化情况，来验证该肝细胞是否产生脂肪变性，并观察雪菊黄酮对脂肪变性肝细胞的作用，探索雪菊在高脂细胞模型上的作用及可能的分子机制。

    1 材料和方法

    1.1 雪菊黄酮 前期的研究[1]已完成了雪菊总黄酮提取物的制备和化学成分分析，通过对雪菊中主要成分的分离纯化，采用乙醇提取、大孔树脂精制工艺，获得了雪菊总黄酮提取物(CTTFE) ......