兰莉，王严，付养华，刘帅良，黎婷，王志斌，习海涛，杨运俊，梅劲

    (1.温州医科大学附属第一医院 超声科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学附属第一医院 放射科，浙江 温州 325015；3.温州医科大学附属第一医院 生殖中心，浙江 温州 325015；4.温州医科大学基础医学院 生物支架移植与免疫研究所，浙江 温州 325035；5.温州医科大学附属第二医院 生殖中心，浙江 温州 325027)

    卵巢去细胞生物支架的制备及鉴定

    兰莉1，王严2，付养华3，刘帅良2，黎婷4，王志斌4，习海涛5，杨运俊2，梅劲4

    (1.温州医科大学附属第一医院 超声科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学附属第一医院 放射科，浙江 温州 325015；3.温州医科大学附属第一医院 生殖中心，浙江 温州 325015；4.温州医科大学基础医学院 生物支架移植与免疫研究所，浙江 温州 325035；5.温州医科大学附属第二医院 生殖中心，浙江 温州 325027)

    目的:通过浸泡加震荡法制备猪部分卵巢组织去细胞生物支架，并对其进行鉴定。方法:健康未成年猪卵巢30个，横切成厚为6 mm的切片，室温条件下，1% SDS溶液浸泡，同时平板震荡器震荡，最后用去离子水清洗其内残留SDS及DNA碎片。获得去细胞卵巢生物支架后，对其进行组织化学染色、DNA残留量定量测定、扫描电镜检查及免疫荧光染色，观察细胞去除情况、支架的三维结构以及细胞外基质中胶原与蛋白质的保留情况。结果:DNA定量分析得出仅15.4%的DNA残留；HE染色、扫描电镜及免疫荧光染色提示支架内未见细胞核残留，并且支架的结构、胶原成分保留较完整。结论:运用浸泡加震荡法能够有效地去除卵巢组织中的细胞成分，并且较完整地保持细胞外基质的支架结构，不同程度地保留一些胶原成分及蛋白质。

    去细胞；卵巢；组织支架；细胞外基质；卵泡

    据统计卵巢早衰在40岁之前发病率为1%，30岁之前发病率约为0.1%[1]。以往文献报道卵巢癌合计发病率为8.28/10万，占我国女性恶性肿瘤发病的3.49%[2]。同时其他部位的肿瘤或疾病如乳腺癌、免疫系统疾病等的放疗、化疗或药物治疗也会不同程度地影响卵巢的功能[3-5]。目前治疗卵巢功能部分或完全丧失的手段包括自体或异体卵巢移植及激素替代治疗。然而，这些手段都会导致一定的不良后果[6-7]，因此如何修复卵巢损伤和重建卵巢功能，是当前妇科及生殖医学领域面临的巨大挑战。2008年OTT等[8]利用灌注法成功制备小鼠离体心脏去细胞生物支架 ......