孙福财，刘雪婷，蔡志斌，张金华

    (1.温州医科大学附属第一医院 口腔科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学附属口腔医院 口腔综合科，浙江 温州 325027)

    慢病毒介导microRNA-214在成牙骨质细胞分化过程中的作用

    孙福财1，刘雪婷1，蔡志斌2，张金华1

    (1.温州医科大学附属第一医院 口腔科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学附属口腔医院 口腔综合科，浙江 温州 325027)

    目的:构建microRNA-214沉默慢病毒载体并研究其在成牙骨质细胞分化过程中的作用。方法:常规条件下培养成牙骨质细胞系，并对其进行矿化诱导，检测牙骨质分化及矿化相关标记物的变化。随后，构建microRNA-214沉默慢病毒载体并感染成牙骨质细胞，荧光显微镜观察其感染效率，并用茜素红和Von kossa染色检测不同组成牙骨质细胞的矿化能力，最后检测不同组之间牙骨质分化标志物的变化。结果: Real-time PCR结果显示，随着诱导时间的延长，成牙骨质细胞分化的标志物ALP、Runx2、BSP、OCN、Col1a和CAP mRNA的相对表达量逐渐增加。空白组、阴性对照组和microRNA-214沉默载体组感染成牙骨质细胞系比率达到90%以上。相对于空白组和阴性对照组，microRNA-214沉默组microRNA-214的表达量显著下降，这表明microRNA-214沉默载体很好地发挥了沉默功能。相对于空白组和阴性对照组，microRNA-214沉默组能显著提高成牙骨质细胞的增殖速率。成牙骨质细胞矿化程度的检测发现，相对于空白组和阴性对照组，microRNA-214沉默组矿化结节数量增多，形态变大。同时，成牙骨质细胞分化的标志物ALP、Runx2、OCN、Col1a、BSP和CAP的表达量在microRNA-214沉默组中均显著增加。结论:microRNA-214沉默能够促进成牙骨质细胞分化。

    microRNA-214；慢病毒属；牙骨质；细胞分化；牙再矿化

    牙周病是人群中最广泛流行的慢性感染性疾病。根据世界卫生组织口腔健康流行病学调查，成年人中约80%患有不同程度的牙周疾病，并已威胁到各个年龄人群，是成年人失牙的首要原因[1]。牙周病对人类的健康危害如此之大，是因为它会引起牙龈和牙周膜胶原纤维进行性溶解破坏以及牙骨质和牙槽骨的吸收缺陷。牙周再生治疗的目的就是重建牙周组织。但牙周再生非常困难，是行内公认的难题，目前世界各国的口腔科研工作者都致力于开发有效促进牙周再生的治疗手段[2] ......