杨再兴，梁艳，刘东红，张治宇，仲人前

    (1.台州市第一人民医院 检验科，浙江 台州 318020；2.上海长征医院 实验诊断科，上海 200003；3.上海长征医院 贵宾科，上海 200003)

    丙酮酸脱氢酶复合体E2亚基通过活化Toll样受体4影响单核细胞分泌细胞因子

    杨再兴1，梁艳2，刘东红1，张治宇3，仲人前2

    (1.台州市第一人民医院 检验科，浙江 台州 318020；2.上海长征医院 实验诊断科，上海 200003；3.上海长征医院 贵宾科，上海 200003)

    目的：探讨丙酮酸脱氢酶复合体E2亚基(PDC-E2)是否可以活化Toll样受体4(TLR4)-NF-κB通路，并通过该通路诱导单核细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素12(IL-12)和可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)。方法：培养单核细胞株U937，分为空白对照组、PDC-E2组、PDC-E2+HTA125组和PDCE2+PDTC组。空白对照组不予任何刺激；PDC-E2组予2、10和50 μg/mL的PDC-E2刺激；PDC-E2+HTA125组予10 μg/mL的TLR4功能抑制抗体HTA125孵育4 h后，再加入50 μg/mL的PDC-E2；PDC-E2+PDTC组加入100 nmol/mL的NF-κB抑制剂PDTC 0.5 h后，再加入50 μg/mL的PDC-E2。通过流式细胞术检测TLR4表达，EMSA实验检测NF-κB活化情况，ELISA法检测培养上清TNF-α、IL-12和sTRAIL浓度。结果：2、10和50 μg/mL浓度PDC-E2刺激U937细胞24 h，TLR4表达均明显增加，但无浓度依赖性。浓度为50 μg/mL的PDC-E2刺激U937细胞1 h，NF-κB即显著活化；至2 h，活化逐渐减少；至4 h，已明显减少。加入HTA125后，NF-κB活性较阻断前显著降低。浓度为50 μg/mL的PDC-E2刺激U937细胞24 h，培养上清TNF-α和sTRAIL的浓度显著高于空白对照组(P<0.05)，IL-12与空白对照组比差异无统计学意义；至48 h和72 h，TNF-α、IL-12和sTRAIL的浓度均显著高于空白对照组(P<0.05)。加入HTA125或PDTC后，各时间点3种细胞因子的浓度均较阻断前显著降低(P<0.05)。结论：PDC-E2可以活化TLR4-NF-κB通路，并通过该通路刺激单核细胞分泌细胞因子TNF-α、IL-12和sTRAIL。

    丙酮酸脱氢酶复合体；Toll样受体4；核因子；细胞因子；原发性胆汁性胆管炎 ......