杜若茜，周巧珍，杨征宇，麻健丰

    (温州医科大学口腔医学院附属口腔医院 修复科，浙江 温州 325027)

    树脂改性玻璃离子在口腔科广泛用于充填、粘结及窝沟封闭等。Vitrebond(美国3M公司)为其中一种，它既保持了传统型玻璃离子的优点，同时还具有树脂粘接强度高、表面特性及美学性能好等特点[1]。但是，很多与其他玻璃离子材料的比较研究显示Vitrebond有细胞毒性[2-4]，甚至在ISO 7405：2008《牙科医学医疗器械在牙科医学应用中生物相容性的评估》中被选作阳性对照。固化时间过长或者过短，在树脂聚合时会导致单体转化的不完全，释放宽频谱的残留化合物[2]。根据以上综合因素，本研究选择树脂改性玻璃离子Vitrebond作为实验对象，研究不同光固化时间对其细胞毒性的影响，为临床应用提供实验基础和理论依据；同时比较琼脂扩散法和MTT法的敏感度，以供其他学者进行相关研究时参考。

    1 材料和方法

    1.1 材料 L929成纤维细胞(CCL 1，美国标准菌库)，青霉素G(100 U/mL)、链霉素(100 μg/mL)、两性霉素B(0.25 μg/mL)、MEM盐溶液、左旋谷氨酰胺、碳酸氢钠、中性红试剂、MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒、二甲基亚砜(DMSO，美国Sigma公司)，棉籽油(比利时Acros Organics公司)，6%牛胎儿血清(美国Hyclone Laboratories公司)，Vitrebond(美国3M公司)。

    1.2 设备 光固化灯1 000 mw/cm2(美国3M公司)，辐射表(美国Demetron/Kerr公司)，自动化细胞计数器(美国Invitrogen公司)，6孔细胞培养板(美国BD公司)，96孔细胞培养板(美国Corning Costar公司)，无菌滤片(d=6 mm，美国Millipore公司)，倒置显微镜(日本Olympus公司)，分光光度计(美国Bio-Rad公司)。

    1.3 样本制备和分组方法 对照组样本制备和分组：将MEM和棉花籽油(CS Oil)分别作为极性和非极性萃取液，苯酚作为阳性对照，MEM、CS Oil作为阴性对照。实验组样本制备和分组：选用美国3M公司提供的产品Vitrebond，根据说明书以粉液比1.4∶1分别制成2 mm厚，直径为5 mm圆柱形样本。分为4个组，每组样本8个，共计32个样本，在1 000 mw/cm2(3 M/ESPE Elipar Freelight)的光固化强度下(具体时间见表1)，将样本称重，加入0.2 g/mL MEM或CS Oil ......