陈旭东，程开，吕开绩，张丽芳，朱冠保

    (1.温州医科大学附属第一医院 胃肠外科，浙江 温州 325015；2.温州医科大学 微生物学与免疫学教研室 分子病毒与免疫研究所 热带医学研究所，浙江 温州 325035)

    程序性死亡受体(programmed cell death protein 1，PD-1)作为一种免疫检查点，表达于T细胞表面，而T细胞在肿瘤免疫中起到重要的作用。而程序性死亡受体配体-1(programmed cell death ligand 1，PD-L1)作为其配体可与其结合，并抑制T细胞的活性[1-3]。PD-L1是一种I型跨膜蛋白，全长为290个氨基酸，相对分子质量为33 kDa，广泛表达于多种肿瘤细胞表面[4-6]。肿瘤细胞产生的PDL1可以使之免受免疫细胞的细胞杀伤作用，而拮抗PD-L1与其受体PD-1结合，能够让T细胞正常活化，并发挥肿瘤杀伤作用[7]。现在已有针对人PD-1或PD-L1的多种单克隆抗体和小分子亲和体上市或处于临床试验阶段，包括Nivolumab[8-9]、Pembrolizumab[10-11]，Atezolizumab[12-13]、Avelumab[14]，并在多种肿瘤的治疗中展现出令人瞩目的效果。B细胞表位是抗原上能和抗体的互补决定区互补结合的区域。B细胞表位可用于疫苗的制备，单克隆抗体的研制和小分子亲和体的高通量筛选，具有针对性强、作用稳定等特点，因此B细胞表位的研究是免疫学研究的重要部分。PD-L1 B细胞的表位的研究已有报道[15]，但其为构象表位，位于β折叠中，难以用人工合成多肽的方式模拟。故本研究利用生物信息学方法，以PD-L1的全长氨基酸序列为基础，对人和小鼠PD-L1 B细胞表位进行预测和分析，期望找到可以用人工合成多肽模拟的B细胞表位，可为单克隆抗体的研制和高通量小分子亲合体筛选等提供理论依据。

    1 材料和方法

    1.1 人与小鼠PD-L1全长氨基酸序列的获取 人与小鼠PD-L1全长氨基酸序列检索于uniProt蛋白质数据库(http：//www.uniprot.org/)，提供氨基酸序列编号。

    1.2 人与小鼠PD-L1全长蛋白的二级结构预测 结合EXPASY服务器提供的GOR4、SOPMA、Scratch Protein Predictor(SPP)程序对人与小鼠PD-L1胞外段氨基酸序列进行二级结构的分析 ......