徐霞芳，童梦琪，蒋倩瑶，赵应征，徐荷林

    (温州医科大学 药学院，浙江 温州 325035)

    盐酸阿霉素(dxoorubicin，DOX)为蒽醌类阳离子型抗肿瘤抗生素，其抗瘤谱广，已被FDA批准用作多种癌如血癌、乳腺癌、淋巴瘤以及各种软组织癌治疗的一线药物[1-3]。多疗程放化疗后，肿瘤耐药的产生以及剂量依赖的心脏毒性，使该药物临床一线应用存在挑战。双硫仑又叫做戒酒硫(disulfiram，DSF)，为亲脂性药物，能不可逆地抑制乙醛脱氢酶，用于酒精成瘾治疗已有几十年。近年来，研究发现DSF及代谢产物具有抗肿瘤活性，能增加耐药肿瘤细胞对多数一线化疗药物的敏感性[4-5]。已有多项研究表明DSF既能作用于ROS-MAPK和NF-κB信号通路，对三阴性乳腺癌、乳腺癌干细胞以及脑胶质瘤具有抑制作用，又可以永久性灭活肿瘤耐药相关的P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)，临床已被批准用于预防肿瘤耐药的产生[6-7]。有研究表明DSF作为化学增敏剂与DOX等一线化疗药物联合应用，能提高抗肿瘤效果、降低心脏毒性[8]。但DSF口服给药因在胃肠道或血液中快速降解、稳定性差，口服生物利用度低[9-10]。

    课题组前期以聚乙二醇单甲醚(monomethoxypolyethylene glycol，mPEG)为亲水嵌段、聚乳酸共聚羟基乙酸(poly-D，L-lactic-co-glycolic acid，PLGA)为疏水嵌段，以及聚谷氨酸(poly-L-glutamic acid，PGA)为功能性嵌段，构建了mPEGPLGA-PGA三嵌段聚合物，该聚合物能自发组装成纳米胶束[11]。该纳米胶束中功能性的PGA链段能与DOX产生静电作用，能获得高达25%载药量和良好的载药稳定性，在10%血浆蛋白中药物渗漏率小于20%[12]。在此基础上，本研究以DSF作为化学增敏剂与PLGA经疏水作用，与DOX共同担载在mPEG-PLGAPGA纳米胶束内，制备了双载药纳米胶束，对双载药纳米胶束进行了体外表征和体外抗肿瘤效果的评价。

    1 材料和仪器

    1.1 材料 mPEG-PLGA-PGA(链段相对分子质量：mPEG，5.0 kDa；PLGA，20 kDa；PGA，7.9 kDa，实验室合成)；DSF(日本和光株式会社)；DOX(98%，北京华奉联博科技有限公司)；人乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADR(南京凯基生物科技发展有限公司)；RPMI1640培养液、胎牛血清、胰酶购自美国GIBCO公司；MTT、DAPI试剂盒购自美国Sigma公司 ......