潘录录，支英豪，王小同

    (1.温州市中医院 康复科，浙江 温州 325000；2.温州医科大学附属第二医院 康复科，浙江 温州325027)

    慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是一组气流受限为特征，气流受限不完全可逆，呈进行性发展，但可预防和治疗的疾病。许多研究均表明COPD患者存在不同程度的骨骼肌功能障碍，主要体现在运动耐量的下降[1-2]。其中COPD患者下肢骨骼肌具有特征性改变：能量代谢形式转变，线粒体密度降低，活性氧自由基产生增多等，这些改变可以归咎为慢肌纤维的减少(I型肌纤维向 II型转变)，最终导致肌耐力下降[3]。然而COPD骨骼肌功能障碍的确切病理生理机制仍不明确[4]。

    本课题组前期以慢性间歇性低O2高CO2(chronic intermittent hypoxia hypercapnia，CIHH)动物模型成功模拟了COPD的主要病理生理过程[5]，发现大鼠暴露在CIHH环境仅超过2周即可造成骨骼肌障碍，肌纤维出现局部萎缩，并且排列紊乱，脂肪沉积增多，炎性细胞浸润，肌细胞线粒体结构破坏明显[6-7]。证实了COPD模型大鼠存在骨骼肌功能障碍。研究表明miR-1与骨骼肌障碍关系密切，miR-1可通过调节骨骼肌相关的蛋白调节骨骼肌基因表达，进而影响肌细胞的增生和分化过程[8]。组蛋白脱乙酰基酶4(histone deacetylase 4，HDAC4)、肌细胞促进因子2(myocyte enhancer factor 2，MEF-2)和过氧化体增殖物激活型受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferators ac-tivated receptor coactivator 1α，PGC-1α)均是miR-1可能影响的下游蛋白分子，因此通过测定miR-1及相关信号通路可进一步明确骨骼肌障碍情况，探索其在骨骼肌中的作用。本研究通过测定miR-1及相关信号通路的蛋白变化，探讨COPD大鼠模型骨骼肌功能障碍的可能机制，同时通过应用神经肌肉电刺激(neuromuscular electrical stimu-lation，NMES)进一步研究康复训练对COPD骨骼肌功能障碍的影响。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物及分组：成年SPF级雄性SD大鼠24只(由温州医科大学动物实验中心提供，动物使用许可证号：wydw2014-0006)。初始体质量为160～180 g。将大鼠编号后按照随机数字表法分成对照组(NC组)、造模组(HH组)和电刺激组(HE组) ......