韩园，黄晨苗，方钱娟，刘启星，南克，项芳芳，曹红，李军

    (温州医科大学附属第二医院 麻醉科，浙江 温州 325027)

    阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一种慢性进行性中枢神经系统退行性病变，其主要病理特征是脑内β-淀粉样蛋白(amyloid-β，Aβ)和tau蛋白异常积聚。目前认为AD是免疫激活的炎症反应过程，神经炎症是疾病慢性进展的原因并加速病理进程[1]。临床研究发现AD患者脑中高迁移率族蛋白1(high mobility group box protein-1，HMGB1)水平升高[2]。胞外HMGB1可被细胞表面多种受体所识别，如晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation endproducts，RAGE)、Toll样受体(Toll-like receptors，TLRs)等，继而激活下游核转录因子-κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)炎症信号转导通路[3]。姜黄素(curcumin)是植物姜黄中提取的一种可食性多酚类，具抗炎、抗氧化等作用，已证实姜黄素对AD动物模型及细胞模型具有确切的治疗效果[4]，但其具体机制尚不明确。本研究拟探讨喂饲姜黄素对淀粉样前体蛋白/早老素1(amyloid precursor protein/presenilin 1，APP/PS1)双转基因小鼠学习记忆和海马Aβ含量及HMGB1、RAGE、TLR4、NF-κB表达的影响，为明确其机制提供参考。

    1 材料和方法

    1.1材料

    1.1.1实验动物及分组：20只雄性APP/PS1双转基因型小鼠[B6C3-Tg(APPswe，PSEN1dE9)85Dbo/NJU]和10只雄性同窝野生型小鼠购买于南京大学模式动物研究所，转基因小鼠随机分为模型组(M组，n=10)和治疗组(T组，n=10)，同窝野生型小鼠作为对照组(C组，n=10)。T组4月龄开始喂饲含有姜黄素(100 mg·kg-1·d-1)的饲料直至9月龄，M组和C组喂饲普通饲料。动物饲养于温州医科大学实验动物中心SPF级动物房，室温保持在(22±2)℃，湿度保持在40%～60%，昼夜交替时间12 h/12 h(9：00-21：00)，动物自由饮水和进食。

    1.1.2试剂及主要仪器：姜黄素(81025)购自美国Cayman公司；BCA蛋白定量分析试剂盒(MK164230)购自美国Pierce公司；兔抗Aβ1-42抗体(ab10148)、兔抗RAGE抗体(ab3611)和鼠抗TLR4抗体(ab22048)购自英国Abcam公司；兔抗HMGB1抗体(6893)和兔抗NF-κB p65抗体(8242)购自美国CST公司；鼠抗β-actin抗体(ap0060)购自美国Bioworld公司；Morris水迷宫装置购自北京硕林苑科技有限公司；电泳转膜仪购自美国Bio-Rad公司；生物分子成像仪购自美国GE公司 ......