郭芳，杨洁，陈晶晶，刘丽，陈云志，郑飞云

    (1.温州医科大学温州市第三临床学院 温州市人民医院 妇产科，浙江 温州 325000；2.温州医科大学附属第一医院 普外科，浙江 温州 325015；3.温州医科大学附属第一医院 妇科，浙江 温州325015)

    试管婴儿技术作为生殖医学的核心技术，为绝大多数不孕症女性带来了福音。然而，对于那些存在先天性子宫畸形、子宫腔广泛粘连及子宫切除术后等女性，她们仍然面临着不孕的困境[1]。子宫组织再生研究无疑为子宫缺陷引起的不孕症患者带来了一种充满前景的治疗希望。通过去细胞化技术获得的天然细胞外基质支架结构已经在众多器官的再生研究中发挥重要的载体作用[2-3]。本研究通过动脉灌注途径，结合各种去细胞化技术，成功制备天然子宫去细胞化外基质支架，经系统评价和鉴定，能够作为子宫组织再生工程的研究应用载体。

    1 材料和方法

    1.1材料

    1.1.1实验动物：清洁级的健康成年雌性SD大鼠，体质量250～300 g，由中国科学院上海实验动物中心提供，在温州医科大学实验动物中心SPF级实验环境中饲养，动物许可证号：SYXK(浙)2015-0009，相关的喂养和操作均在温州医科大学实验动物伦理委员会监督下进行。

    1.1.2主要试剂：0.02%胰酶(北京索莱宝科技有限公司)/0.05%EDTA(美国Sigma公司)溶液：0.25%胰酶/0.5%EDTA溶液以O.1 mol/L PBS稀释lO倍。0.1%十二烷基硫酸钠(SDS，美国Sigma公司)溶液：SDS 1 g，加1000 mL 0.1 mol/L PBS。1%曲亚通X-100(Triton-X100，北京索莱宝科技有限公司)/O.05%EDTA溶液：Triton-X10010 mL，EDTA 500 mg，加970 mL 0.1 mol/L PBS。转化生长因子-β(transforming growth factorβ，TGF-β)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)的ELISA试剂盒(上海博蕴生物科技有限公司)。组织基因组DNA提取试剂盒DP304(北京天根生化科技有限公司)，羟脯氨酸测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

    1.1.3主要实验器材：显微手术器械(上海金钟金属制品厂)；8F、24F、28F硅胶管以及橙盖移液瓶、蓝盖瓶(海门市盛邦实验器材有限公司)；BTl00-2J蠕动泵(保定兰格公司)；扫描电镜(日本日立公司)；超净台(苏州净化设备有限公司)；多功能动物手术台(温州医科大学附属第一医院外科研究所) ......