兰霄霄，周志阳，徐欣欣，吴雪清

    (温州医科大学附属第一医院 妇产科，浙江 温州 325015)

    宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤，虽然近年来宫颈癌疫苗和早期筛查的开展使得宫颈癌的发病率有所下降，但是宫颈癌仍然在女性癌症相关性死亡中占据一定的比例[1]。FENDRR(FOXF1 adjacent non-coding developmental regulatory RNA)是位于第13号染色体的一段长链非编码RNA(long non-coding RNA，lcnRNA)，能与多梳蛋白复合物2(polycomb repressive complex 2，PRC2)或TrxG/MLL复合物结合[2]，对小鼠心脏和体壁的正常发育具有重要作用[3]。已有研究表明FENDRR能通过影响纤连蛋白1的表达进而调控胃癌细胞的转移[4]，但目前尚未见关于其在宫颈癌中的研究。本研究通过在宫颈癌细胞中应用小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)介导的基因干扰技术特异性干扰FENDRR的表达，结合实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR，qRT-PCR)、细胞增殖CCK-8、Transwell以及裸鼠成瘤实验，探讨FENDRR在宫颈癌发病中的作用。

    1 材料和方法

    1.1 材料 宫颈癌细胞株(SiHa和HeLa，美国ATCC细胞库)，Advanced MEM培养基(美国Gibco公司)，胎牛血清(FBS，美国Gibco公司)，siRNA(上海吉玛生物公司)，转染试剂(美国SignaGen公司)，CCK-8试剂盒(日本Dojindo公司)，Transwell小室、Matrigel基质胶(美国Corning公司)，Trizol(美国Invitrogen公司)，氯仿和异丙醇(美国Sigma公司)，PCR引物(北京擎科生物技术公司)(见表1)，反转录试剂盒(PrimeScript? RT reagent Kit)、qRTPCR试剂盒(SYBR?Premix Ex Taq?，日本Takara公司)，裸鼠(上海斯莱克实验动物有限责任公司)，实验动物使用许可证号：SYXK(浙)2015-0009。

    表1 qRT-PCR引物的基因序列

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养：宫颈癌细胞株用含10% FBS、100 ng/mL链霉素、100 U/mL青霉素以及2 μmol/mL谷氨酸钠的Advanced MEM细胞培养基于5% CO2、37 ℃条件下培养 ......