郑丽红，刘翊，朱雪琼

    (温州医科大学附属第二医院 妇产科，浙江 温州 325027)

    宫颈癌在女性恶性肿瘤中的死亡率位居第三，尤其是晚期宫颈癌患者，其5年生存率仅为40%[1-2]。目前，对于晚期宫颈癌患者，顺铂是最有效的化疗药物，然而顺铂缺乏对宫颈癌的靶向功能[3-4]，因此，探索靶向治疗宫颈癌的方法十分必要。

    间充质干细胞是成人非造血干细胞，广泛存在于各种器官和组织的基质[5]。研究表明，间充质干细胞对许多类型的实体瘤具有趋向性，如肝癌、前列腺癌、胶质瘤、骨髓瘤等[6-9]，可作为靶向治疗的良好载体。也有研究发现，间充质干细胞可作为载体细胞携带TRAIL、IL-21、IFN-β等因子靶向治疗肿瘤[10-12]。本研究提取人脂肪组织来源的间充质干细胞(human adipose tissue derived mesenchymal stem cell，hATMSC)，并探讨其对宫颈鳞癌细胞和腺癌细胞的趋化性，为将间充质干细胞研发成为宫颈癌靶向治疗载体提供实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料 研究方案经温州医科大学附属第二医院医学伦理委员会批准。皮下脂肪取自温州医科大学附属第二医院行剖宫产手术的产妇，均已签署知情同意书。人宫颈鳞癌细胞SiHa、MS751、C33-A、CaSki及宫颈腺癌细胞Hela均购于中国科学院上海细胞研究所细胞库。分化培养基购于美国Gibco公司；流式表型鉴定相关的CD90、CD44、CD105、HLAABC、CD34、CD45和HLA-DR抗体均购于美国BD公司。

    1.2 hATMSC分离培养 无菌条件下取剖宫产手术患者的皮下脂肪组织1 cm×1 cm×2 cm，将脂肪组织与表面的结缔组织包膜及血管相分离后，用含4%青链霉素的PBS洗3次，剪碎后加入0.075% I型胶原酶，于37 ℃水浴孵60 min。用含血清的培养基终止消化，细胞滤器过滤，离心，PBS洗2次。用低糖DMEM+10%胎牛血清+1%青链霉素重悬，接种到T25细胞培养瓶培养。48 h后首次换液。

    1.3 hATMSC多向分化诱导及检测 hATMSC以1×105/mL的密度接种于6孔板中，进行多向分化诱导及检测：①诱导分化为成骨细胞：加入成骨分化培养基诱导14 d，诱导完成后进行碱性磷酸酶染色；②诱导分化为脂肪细胞：加入成脂分化培养基诱导14 d，诱导完成后进行油红染色 ......