卓乐盈，吴镇杰，于祥，周美茜，李成业，欧阳金生，林琪斌，蔡畅

    (1.温州医科大学 第一临床医学院，浙江 温州 325035；2.永嘉县中医院 呼吸科，浙江 温州 325105；3.温州医科大学附属第一医院 呼吸科，浙江 温州 325015)

    气道慢性炎症是大多数呼吸道疾病的重要临床病理生理特征。近年来，随着环境污染的逐渐加重，气道慢性炎症性疾病的发生率逐年增长。人体气道与外界环境相通，直接接触各种氧化剂和毒性物质、吸入性过敏原、病原微生物以及空气污染物等，均可通过不同的机制激发炎症反应。

    脂氧素(lipoxins，LXs)是一种重要的内源性脂质抗炎介质，能够促进炎症反应的及时消退，被誉为炎症反应的“刹车信号”或“停止信号”[1]。研究发现LXA4及其类似物在小鼠哮喘模型中具有抑制炎症及促进炎症消退的作用，包括增强自然杀伤细胞功能，刺激巨噬细胞表达CD206[2]，还可以促进肺损伤的修复[3]。但目前LXs在气道炎症进程中参与的信号通路及其分子调控机制尚未完全清楚。本研究通过脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激BEAS-2B细胞，探讨LXA4对气道炎症反应的抑制作用及其所涉及的信号通路。

    1 材料和方法

    1.1 材料 BEAS-2B细胞株购自中国医学科学院昆明细胞库。LPS、Trizol和DCFH-DA试剂购于美国Sigma公司；LXA4购自美国Cayman Chemical公司；BEGM培养基购自美国Lonza公司；RPMI 1640培养基、胎牛血清购自美国Gibco公司；谷胱甘肽(Glutathione，GSH)检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；BCA试剂盒、细胞浆和细胞核蛋白抽提试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；人p38、p-p38抗体购自美国Cell Signal Technology公司；人核因子E2相关因子(nuclear factor erythroidderived 2-like 2，Nrf2)、p-Nrf2、核纤层蛋白B1(Lamin B1)抗体购自美国Abcam公司；人β-tubulin抗体购自杭州联科生物公司；SYBR Green realtime PCR Master Mix、反转录-聚合酶链反应试剂盒购自日本Takara公司；引物由上海生工生物工程有限公司合成。

    1.2 方法

    1.2.1 试剂配制：LPS配成贮存浓度为100μg/mL 的溶液，分装后-20℃保存；为保持试剂稳定性，LXA4用无菌无水乙醇溶解，配成贮存浓度为100 μmol/L 的溶液 ......