任晓燕，陈亚茹，时雯雯，郑斌娇，薛凌，管敏鑫

    (温州医科大学，浙江 温州 325035，1.检验医学院 生命科学学院；2.Attardi线粒体生物医学研究院)

    高血压是一种常见的慢性疾病，分为原发性高血压和继发性高血压，其中原发性高血压原因不明，约占全部高血压的95%[1]，是一种由基因和环境等多种因素共同调控的疾病，遗传方式主要涉及4种：常染色体显性、常染色体隐性、性染色体连锁和线粒体遗传，线粒体基因突变已报道与原发性高血压相关[2-4]。但线粒体基因突变并不是疾病发生的唯一条件[5]，核修饰基因同样会参与线粒体基因突变导致的原发性高血压表型的表达[6]，线粒体的功能不仅仅由线粒体基因调控，同时还需要核基因的参与。如线粒体蛋白翻译过程中，OXPHOS受mtDNA和核基因双重编码，此外还有许多蛋白受核基因的编码，在细胞质合成后转运到线粒体发挥功能。同时，mtDNA的合成、复制以及编辑修饰过程等也由核基因编码，因此，mtDNA结构和功能的完整性与核基因存在密不可分的关系。本研究通过对原发性高血压患者进行临床资料及基因组测序筛查，以线粒体tRNA基因突变和核基因YARS2基因突变作为切入点，发现一个高外显率的原发性高血压家系携带线粒体tRNAMet(以下简写为m.)4435A>G和YARS2c.5750A>C突变，并通过生化功能实验研究其对线粒体功能的影响，探讨m.4435A>G和YARS2c.5750A>C突变与原发性高血压的相关性。

    1 对象和方法

    1.1 对象 对同时携带m.4435A>G突变和YARS2c.5750G>T突变的原发性高血压家系进行样本采集和临床资料的完善，同时筛选并采集与突变组单体型相同的正常对照组样本。将研究对象分为4组：正常对照组细胞株，单突变组细胞株仅携带m.4435A>G突变，双突变杂合组细胞株同时携带m.4435A>G突变和YARS2c.5750A>C杂合突变，双突变纯合组细胞株同时携带m.4435A>G突变和YARS2c.5750A>C纯合突变。携带m.4435A>G突变和YARS2c.5750A>C突变的耳聋家系来自浙江省。携带YARS2c.5750A>C单突变的样本来自江西省。正常对照样本来源于本课题组前期建立的正常样本资源数据库。参与本研究的患者家系及正常对照样本人群均已按照温州医科大学伦理委会管理规定的方法签署知情同意书，符合伦理学规范，严格遵守伦理学规定和要求。构建采集的突变样本及正常对照样本的永生化淋巴母细胞系，并利用基因测序等手段对转化细胞的成功性进行验证 ......