顾霄鹏，巢海潮，顾岳全

    (1.浙江大学舟山医院 骨科，浙江 舟山 316101；2.江西省人民医院 分子生物实验室，江西 南昌330006；3.舟山顾鹤传骨伤医院 正骨科，浙江 舟山 316101)

    关节炎(osteoarthritis，OA)是骨科最常见的疾病之一，也是多种骨关节疾病常见的共同病理表现，其发病机制复杂，治疗缺乏特异并行之有效的办法，治疗效果难以把控。现有研究证实OA的病因主要是软骨细胞被破坏。软骨破坏是基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)和聚集蛋白聚糖酶(aggrecanase，ADAMTS)家族中蛋白酶共同介导的结果[1]。软骨细胞是OA关节内MMP表达的主要来源，MMP的增多是通过组蛋白乙酰基转移酶和组蛋白脱乙酰化酶(histone deacetylase，HDAC)家族中的酶催化蛋白乙酰化反应产生的[2]。这些酶不仅可以调节DNA和组蛋白核小体的相互作用，同时也能使细胞核和胞质蛋白都逆乙酰化，最终导致关节功能发生改变[3]。提示组蛋白乙酰化修饰在OA关节软骨退化过程中发挥了关键作用，但其具体机制不明。

    本研究通过内侧半月板不稳术(destabilization of the medial meniscus，DMM)构建SD大鼠OA模型，选取广谱性HDAC抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A，TSA)进行体内干预，观察TSA对软骨退化的影响。选取TSA及选择性HDAC抑制剂丙戊酸(valproic acid，VPA)和MS-275，并验证各抑制剂的活性；体外培养人源性关节软骨细胞(human articular chondrocyte，HACs)及软骨肉瘤细胞SW-1353，采用以上HDAC抑制剂及I型HDAC各亚型特异性siRNA，并结合MMP诱导剂白细胞介素-1α(IL-1α)干预，观察各HDAC亚型抑制对细胞MMP表达的影响。进一步利用外植体软骨退化(PNC外植体)试验，验证各HDAC亚型抑制剂对软骨退化的影响。探讨I型HDAC抑制剂在阻断软骨退化中的作用，并初步揭示其可能作用机制，为OA关节软骨退化的治疗及相关研究提供理论基础和思路。

    1 材料和方法

    1.1 材料 SD大鼠购自长沙天勤生物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(湘)2014-0011。HDAC抑制剂(TSA、VPA、MS-275)均购自美国圣克鲁斯生物技术公司。重组IL-1α和制瘤素M(oncostatin M，OSM)购自上海拜力生物科技有限公司 ......