葛叶盈，王秀珍，袁娜，袁力勇，陈洁

    (宁波市第六医院 麻醉科，浙江 宁波 315040)

    术后认知功能障碍(post-operative cognitive dysfunction，POCD)是严重的术后中枢神经系统并发症。POCD的发病机制至今尚不清楚，脑血管栓塞、痉挛、脑组织的异常灌注等导致的低氧被认为是POCD的主要原因[1]。低氧诱导因子(hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)作为一种转录因子，在缺氧条件下，可以启动多种下游基因的转录激活，包括能激活下游促凋亡基因p53和BNIP3的表达，加强神经细胞的凋亡，导致神经细胞变性坏死，从而引起认知功能障碍[2]，但迄今为止未见HIF-1α参与POCD损伤机制的报道。目前认为老龄是唯一被明确的POCD危险因素[3]，手术创伤可能是主要的原因，本课题组前期研究发现肝切除术后老龄小鼠可出现短期认知功能障碍[4]，但具体机制尚不清楚。本研究观察肝部分切除术对老年小鼠认知功能和海马HIF-1α及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响，同时观察使用特异性HIF-1α抑制剂3-(5′羟甲基-2′呋喃基)-1苯甲基引唑(YC-1)对上述各指标的影响，以探讨HIF-1α蛋白及其下游基因作为POCD治疗新靶点的可能性。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物及分组：选用C57BL/6雄性小鼠，清洁级，鼠龄18个月，体质量25～35 g，由宁波大学动物研究所提供，实验动物许可证号：SYXK(浙)2013-0191，置25 ℃环境中饲养。利用Morris水迷宫测试剔除实验第5天在2 min内仍找不到平台的小鼠，最后筛选出48只并按随机数字表法分成3组：假手术组(Sham组，n=16)、手术+0.9%氯化钠溶液组(手术+NS组，n=16)和HIF-1α抑制剂YC-1组(手术+YC-1组，n=16)，各组小鼠根据手术后测试时间的不同分为术后1 d、3 d两个亚组，各亚组8只。

    1.1.2 主要试剂和仪器：鼠抗人HIF-1α单克隆抗体购自美国Novus公司，凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3多克隆抗体购自美国CST公司 ......