沈新升，陈鸥，赖宪良，苏嘉

    (温州市中西医结合医院 骨科，浙江 温州 325000)

    骨缺损是临床治疗中常见的难题，组织工程学细胞经分化后提供分化的成骨细胞[1-3]，这些细胞具有成骨细胞的生理功能，是目前研究的热点。但这些诱导的细胞随着分化增殖的代数增多，表现出衰老的迹象，不能很好地维持自身的功能，给临床转化带来了限制。诱导性多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells，IPS细胞)是能无限制定向分化为各种间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)的种子细胞[4]。目前已有将IPS细胞分化为成骨细胞的报道[5-7]。然而IPS细胞在低氧环境中的生理状态及能否发挥生理作用目前尚不清楚，有报道认为红景天苷对细胞在低氧环境中有保护作用[8]。本研究对IPS诱导的成骨细胞分成正常组、低氧组、红景天苷预处理组，探讨红景天苷对IPS诱导的成骨细胞在低氧环境的生理状态的保护作用以及可能的机制。

    1 材料和方法

    1.1 材料 小鼠胚胎成纤维细胞购自上海典藏细胞库，293T细胞购自上海斯丹赛生物技术有限公司，BALB/c型4周龄小鼠购自温州医科大学动物实验中心，实验动物许可证号：SYXY(浙)2010-0150，实验在温州市中西医结合医院细胞实验中心进行。含Oct4、SOX2、C-MYC和KLF4的慢病毒质粒由广州四和公司包装， II型胶原蛋白酶和胰酶(美国Sigma公司)，胎牛血清、DMEM/F12培养基、100×青链霉素(美国Gibco公司)，抗坏血酸、甘油磷酸、地塞米松(美国Sigma公司)，β-actin抗体(美国Proteintech集团)，RIPA细胞裂解液、BCA蛋白含量测定试剂、SDS-PAGE凝胶配制试剂盒、DAB发光液、TBST液(上海碧云天公司)，FITC/PI试剂盒(美国Sigma公司)。红景天苷(纯度>99%，中国药品生物制品鉴定所)。低氧诱导因子-1(hypoxia induced factor-1 ......