牛燕，周怡，郑宏，赵良才，李晨，高红昌

    (温州医科大学 药学院，浙江 温州 325035)

    结直肠癌是临床常见的恶性肿瘤之一，在世界范围内发病率位居第三，致死率位居第四[1]。在我国，结直肠癌的发病率和病死率呈逐年上升的趋势，严重威胁着人类的生命健康[2]。转移是恶性肿瘤的重要生物学表型，是结直肠癌患者病死的主要原因之一。而异常的代谢模式是恶性肿瘤的另一重要特征[3]，多项研究[4-6]表明代谢方式的改变参与肿瘤转移。基于核磁共振氢谱(1H nuclear magnetic resonance spectroscopy，1H NMR)的代谢组学方法，能定性、定量分析代谢物水平，已广泛用于筛选疾病发生相关的生物标志物，探讨发病机制和药物动力学研究等[7-8]。本研究基于1H NMR的代谢组学技术，探索SW480、SW620两种不同转移潜能的结肠癌细胞的代谢模式，为进一步筛选结直肠癌转移相关标志物和寻找新靶点提供依据。

    1 材料和方法

    1.1 细胞和主要试剂 人结肠癌高转移性细胞株SW620和低转移性细胞株SW480购自美国菌种保藏中心。PMI Modified Medium培养基购自美国Hyclone公司，磷酸盐缓冲液购自北京Solarbio公司，0.25%Trypsin购自上海吉凯基因科技有限公司，三甲硅烷基丙磺酸钠(TSP)购自美国Sigma公司，D2O(99.9%氘代)购自美国剑桥同位素实验室，谷氨酰胺LGlutamine、葡萄糖D-(+)-Glucose Solution购自美国Sigma公司，NaOH购自美国Acros Organics公司，XF Base Medium Minimal基础培养液、XF Calibrant校准液、Seahorse XF细胞线粒体压力测试试剂盒、Seahorse XF糖酵解压力测试试剂盒购自美国Seahorse Bioscience公司，胎牛血清购自美国GEMINI公司。

    1.2 主要仪器 Bruker AVANCE III 600 MHz NMR波谱仪购自德国Bruker公司，Seahorse XF96细胞能量代谢分析仪购自美国Seahorse Bioscience公司，无CO2培养箱、CO2培养箱、超低温冰箱购自美国Thermo公司，低温高速离心机购自德国Eppendorf公司，超净台购自北京东联哈尔仪器制造公司，倒置显微镜购自日本Nikon公司，冷冻干燥机购自德国Christ公司 ......