陈庆新，李文姝，陈卓艳，何佳莉，汪文寰，林茂，叶菊秀

    (温州医科大学，浙江 温州 325035，1.微生物学与免疫学教研室；2.眼视光学院)

    乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)在中国高度流行，根据HBV基因序列，可将世界范围内的HBV分为A-H 8个基因型，各基因型间核苷酸序列同源性差异超过8%，我国流行的HBV基因型主要为B和C型[1]。HBV感染过程中的免疫耐受和免疫逃逸是HBV慢性感染发生的重要致病机制[2]，而HBV特异性的细胞毒性T细胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)介导的细胞免疫应答，是最终清除HBV的关键，因此对国内流行基因型的CTL表位进行对比分析，将有助于了解HBV免疫逃逸特点，从而找到稳定特异性CTL靶点，为HBV感染后的治疗奠定基础。

    本研究主要对HBV在国内流行的B和C基因型S区基因编码蛋白HLA-A*0201限制性CTL表位进行了生物信息学筛选，CTL表位长度选择为9个氨基酸，结合已鉴定和报道的表位及GenBank中已有的B和C基因型进行比较，寻找稳定的B和C基因型S区基因编码蛋白HLA-A*0201限制性CTL表位，探索可以用于HBV细胞免疫治疗的表位。

    1 材料和方法

    1.1 试剂与载体 pIRES载体、pGEM-T-HBV全基因组(HBV C基因型)重组载体由本实验室保存，Proteinase K购自德国Merck公司。IPTG、Ampicilin、X-Gal、进口CaCl2、胰蛋白酶(1∶250)、UNIQ-5柱离心式胶回收试剂盒、Taq plus DNA Ploymerase及dNTP Mix等购自上海生工生物工程有限公司 ......