徐天臻，王臣健，汤呈宣

    (温州医科大学附属第三医院 瑞安市人民医院 脊柱外科，浙江 温州 325200)

    脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)是临床常见的严重创伤，常导致永久性感觉和运动功能丧失，引起瘫痪甚至威胁生命[1-2]。SCI的病理过程可分为2个阶段:原发性损伤由机械损伤引起，难以逆转；继发性损伤则由血管损伤、氧化应激、炎性反应、谷氨酸兴奋性毒性、细胞凋亡和坏死等引起的复杂病理级联反应，最终引起神经细胞的凋亡，导致脊髓进一步损伤[3-5]。因此，限制继发性损伤进程从而减轻神经元凋亡或许可以促进SCI之后的功能恢复[6]。

    维格列汀(vildagliptin，Vilda)是口服二肽基肽酶-4(dipeptidyl peptidase 4，DPP4)抑制剂类降糖药物，已在110余个国家批准使用[7]。近来有研究指出Vilda除降糖作用外，还具备抗氧化应激、维持线粒体功能、抗炎、抗凋亡等作用[8-9]。其神经保护作用已在大鼠阿尔茨海默症(Alzheimer's disease，AD)模型中提及[10-11]，但其在大鼠SCI模型中的作用报道较少，因此，本实验研究Vilda对SCI后大鼠运动神经元凋亡及运动功能的影响。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物及分组:选用雌性SD大鼠48只，清洁级，体质量200～250 g，由温州医科大学实验动物中心提供，实验动物许可证号:SYXK(浙)2014-0006，给予足量的水和饲料，在23～25 ℃的环境下喂养。采用随机数字表法将适应性喂养1周后的大鼠分为3组:假手术组(Sham组)、手术组(SCI组)、Vilda治疗组(SCI+Vilda组)，每组16只。

    1.1.2 主要试剂与仪器:Vilda购自美国MCE公司，使用时将药物按2 mg/mL的浓度在超声波帮助下溶于0.9%氯化钠溶液；制备压迫型大鼠SCI模型器械由温州医科大学附属第二医院骨科实验室提供(血管夹夹持应力:30 g)；凋亡相关蛋白Bcl-2单克隆抗体购自英国Abcam公司，Bax、Cleaved Caspase 3单克隆抗体均购自美国CST公司；山羊抗鼠抗体、山羊抗兔抗体均购自上海翊圣公司；尼氏染色液(焦油紫法)购自北京索莱宝公司。全自动酶标仪购自美国Thermo公司，电泳仪和自动凝胶成像仪购自美国Bio-Rad公司，荧光显微镜购自日本奥林巴斯公司 ......