锌对邻苯二甲酸酯类暴露致雄性生殖毒性的干预作用
睾酮,睾丸,1材料和方法,2结果,3讨论
孙悦,杨柳,史弘毅,李安琪,戴绮梦,金思伊,高海涛(温州医科大学 公共卫生与管理学院预防医学系,浙江 温州 325035)
邻苯二甲酸酯类(phthalates,PEs)是环境雌激素,其作为塑化剂应用于塑料制品,在生活中广泛存在。根据国标GB9685-2016,某些PEs在食品接触塑料材料中的最大使用量高达43%[1]。PEs易从塑料中逸出,使人暴露其中。据报道,我国人群总PEs暴露水平为23~159 μg·kg-1·d-1,可能处在风险中[2]。研究表明,PEs暴露可致动物生殖功能损伤[3],与男性生殖功能障碍相关[4]。PEs暴露具有多种类、长期、低剂量的特点。前期研究发现,PEs混合物(MIXPs)长期低剂量暴露可致大鼠雄性生殖功能损伤[5-6]。锌与生殖功能和精子生成密切相关,锌缺乏可致雄性生殖功能损伤[7-8];而锌干预可抑制氟、铝暴露所致的雄性生殖毒性[9-10],提示锌可能对PEs暴露诱导的雄性生殖功能损伤有保护作用。本研究模拟人群PEs暴露的实际特点,探讨了锌对MIXPs暴露诱导小鼠雄性生殖毒性的干预作用。
1 材料和方法
1.1 试剂与仪器 邻苯二甲酸丁苄酯(BBP)、邻苯二甲酸正二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)和分析纯均购于上海阿拉丁公司;ZnSO4·7H2O购于北京国药集团化学试剂有限公司;BCA蛋白浓度测定试剂盒、总超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)试剂盒均购于上海碧云天生物技术有限公司;小鼠睾酮(T)试剂盒购于南京建成生物工程研究所。EnSpire酶标仪为德国珀金埃尔默公司产品,ECLIPSE Ti-E倒置显微镜为日本尼康公司产品,IKA T10高速分散器为德国IKA公司产品,Centrifuge 5417R离心机为德国Sigma公司产品。
1.2 实验方法 MIXPs为3 种PEs的等毒性混合物,根据其每日可耐受摄入量(TDI)值[2],按BBP:DBP:DEHP=10:5:1 的质量比等毒性混合。以0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液为赋形剂,配制MIXPs悬浊液。36 只雄性ICR小鼠购于上海斯莱克实验动物有限责任公司动物许可证号:SCXK(沪)2017-0005 ......
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