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编号:1428404
莪术醇对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响
http://www.100md.com 2019年10月21日 温州医科大学学报 2019年第10期
划痕,1材料和方法,2结果,3讨论
     戴凌虹,孙云,陈祥艳

    (温州市中医院 妇产科,浙江 温州 325000)

    卵巢癌是女性中最常见的恶性肿瘤之一,手术是其首选治疗方案,但高转移率导致难以清除转移病灶,对临床预后产生较差影响[1]。经手术后放、化疗患者有多达75%复发,且5年生存期仅为30%~40%[2-3]。中草药综合治疗卵巢癌的优势在临床中日益突显,不仅可特异性杀伤肿瘤细胞,而且对正常组织伤害小,从中草药中寻找安全有效的抗肿瘤药物已成为研究热点。莪术醇是从姜黄根茎中提取的一种黄酮类小分子化合物,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等功效[4]。莪术醇能诱导多种癌细胞凋亡,但目前对莪术醇作用于卵巢癌SKOV3细胞的具体机制研究甚少。本研究旨在观察莪术醇对SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,并以PI3K/AKT通路为靶点,探讨莪术醇的作用机制,为其临床应用提供理论依据。

    1 材料和方法

    1.1材料

    1.1.1 药品:莪术醇,相对分子质量为236.35 kDa,质量分数>98%,购自中国食品药品检定研究院,批号为111463-201708,于使用前用无水乙醇溶解,并用培养基稀释成所需浓度。

    1.1.2 试剂与主要仪器:卵巢癌SKOV3细胞株购自武汉普诺赛生命科技有限公司;DMEM/F12培养基、胎牛血清、胰酶均购自美国Gibco公司;LY294002购自美国Sigma公司;兔抗鼠PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT一抗购自英国Abcam公司;CCK-8试剂盒、羊抗兔二抗购自武汉博士德公司;RIPA裂解液、BCA试剂盒购自美国Thermo公司;CO2培养箱、MK3型酶标仪购自美国Thermo公司;低温高速离心机购自德国Eppendorf公司;流式细胞仪购自美国BD公司;凝胶成像分析仪购自美国Bio-Rad公司。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养:SKOV3细胞常规培养于5%的CO2、饱和湿度、37 ℃恒温培养箱中,培养基为含10%胎牛血清和1%青霉素、链霉素的DMEM/F12培养基 ......

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