姜黄素调控子宫内膜癌细胞糖酵解过程的机制
1材料和方法,2结果,3讨论
金纬纬,林一禾,赵小迎,庄晓苹,蔡平生(温州市中西医结合医院 妇科,浙江 温州 325000)
子宫内膜癌为女性生殖道常见的三大恶性肿瘤之一,其发生率占女性生殖道恶性肿瘤的20%~30%。早期的子宫内膜癌手术效果良好,但特殊或晚期子宫内膜癌预后很差,主要采用以化疗为主的姑息性治疗。化疗的不良反应和多药耐受(multidrug resistance,MDR)是影响化疗疗效的主要原因。根据温伯格效应理论,相较正常细胞,肿瘤细胞更倾向于低氧环境,倾向于利用糖酵解途径获取能量。因此如何阻断肿瘤细胞糖酵解过程,破坏肿瘤细胞赖以生存的低氧环境成为抗肿瘤机制研究的重要突破口。姜黄素是由姜科植物根茎中提取的一种多酚类物质,其植物提取物经纯化的成分早已被用于治疗多种疾病[1]。研究证实姜黄素具有抗氧 化[2]、抗炎[3]、抑制肿瘤作用[1],可有效诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的增殖[4]。在前期的研究中,我们发现姜黄素能显著抑制子宫内膜癌细胞的增殖及肿瘤迁移能力,但是其具体作用机制并未完全阐明。本研究旨在研究姜黄素可通过调控子宫内膜癌能量代谢通路,抑制肿瘤细胞生长,及提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 细胞株:实验组:子宫内膜癌细胞Ishikawa (子宫内膜腺癌高分化)/HEC-1-B(子宫内膜腺癌中分化);阴性对照组:正常宫颈上皮ECT1/E6E7细胞;阳性对照组:宫颈癌细胞株Hela细胞株(腺癌)。ECT1/E6E7细胞购自中国医学科学院,Ishikawa、HEC-1-B和Hela细胞由温州医科大学附属第一医院内科实验室赠送。
1.1.2 试剂和耗材:细胞线粒体压力检测试剂盒(103015-100)、细胞糖酵解压力检测试剂盒(货号103020-100)、XF Cell Energy Phenotype Test Kit(103025-100)、细胞能量代谢检测基础培养基(102353-100)、细胞能量代谢检测板(102601-100)购自德国Agilent公司;Cell-tak(354240)购自美国BD公司;乳酸检测试剂盒(MAK064)、丙酮酸检测试剂盒(MAK071)购自德国Sigma-Aldrich公司;TRIzol?Reagent、QuantiTect SYBR Green PCR Kit购自美国Invitrogen公司;cDNA合成试剂盒购自上海生工生物有限公司。5-FU(316-46-1)、姜黄素(458-37-7)购自美国Sigma公司 ......
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