黄燕，周楠

    (丽水市中心医院 麻醉科，浙江 丽水 323000)

    瑞芬太尼为芬太尼类μ型阿片受体激动剂，由于其具有超短作用效应，临床上主要用于全麻诱导、全麻中维持镇痛或辅助麻醉[1-2]。但临床以及基础研究均报道瑞芬太尼可诱发人或大鼠痛觉过 敏[3-4]。因此，研究瑞芬太尼诱发痛觉过敏的信号机制，可为临床预防或减轻痛觉过敏提供理论依据。研究显示，痛觉过敏往往伴随腺苷酸环化酶激活、cAMP生成增加以及钙离子内流[5]。钙激活中性蛋白酶1(calcium-activated neutral protease，Calpain1或CANP1)是一种钙离子依赖性的半胱氨酸蛋白酶，其激活状态需要摩尔级别浓度的钙离子，因此也被称为μ-Calpain[6-7]。目前，CANP1与瑞芬太尼诱导的痛觉过敏间的关系鲜见报道。因此，本研究以瑞芬太尼诱导模型大鼠痛觉过敏，观察CANP1在其中的作用，为临床解决痛觉过敏提供基础理论支持。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物：清洁级(SPF)成年雄性SD大鼠100只，体质量220～260 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，生产许可证号：SCXK(京)2016-0006。每笼4只饲养于排气通风笼具中，12 h光照，12 h黑暗，自由饮水摄食，温度18～26 ℃，相对湿度40%～70%。

    1.1.2 试剂：瑞芬太尼(湖北宜昌人福药业有限责任公司)；U0126和Calpeptin(美国Sigma Aldrich公司)；CAPN1抗体、ERK、p-ERK、GSK-3β、pGSK-3β抗 体、羊抗小鼠IgG-HRP抗体及羊抗兔IgG-HRP抗体(美国CST公司)；GAPDH抗体(美国Bioworld公司)；RIPA裂解液、BCA试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 鞘内和尾静脉置管并筛选合格的大鼠：参照文献[8]方法进行尾静脉和鞘内置管 ......