刘欣，谢旺凯，孙祥威，陈治元，沈贤，薛向阳

    (1.温州医科大学附属第二医院育英儿童医院胃肠外科，浙江温州325027；2.温州医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室，浙江温州325035)

    人巨细胞病毒(humancy to megalovirus，HCMV)是一种广泛存在于人群中的病毒，属于β疱疹病毒家亚科，包含236kb的双链DNA基因组，其人群携带率在婴幼儿约为20%，随着年龄的增长在发展中国家可达100%[1]。在免疫功能正常的个体，HCMV感染通常无明显临床症状，而其在免疫功能缺陷的个体，如HIV患者，或者在接受器官移植的患者中会再次激活而导致严重的并发症，甚至危及生命[2]。UL111A基因在HCMV中编码细胞因子，其主要编码cmvIL-10和LAcmvIL-10蛋白，由于它们与hIL-10有一定的同源性，可以通过与IL-10R结合而发挥免疫抑制调节功能[3-6]。目前AD169 UL111A基因在人包皮成纤维细胞(human foreskin fibroblast，HFF)中的转录本的情况还未见报道，本研究旨在探究HCMV增殖性感染不同时间点UL111A基因转录本特征及变化。

    1 材料和方法

    1.1 材料 HFF和293T细胞购自中国科学院细胞库，AD169 病毒株购自美国ATCC，TRIzol、Lipofectamine 2000 购自美国Invitrogen公司，pcDNA3.1载体为本实验室保存，反转录试剂盒(FSQ301)购自日本TOYOBO公司，HA-Tag兔抗(#3724)和羊抗兔IgG HRP偶联(#7074)二抗购自美国CST公司，高保真酶购自南京诺唯赞生物科技有限公司，PCR反应试剂盒、pEASY-Blunt Zero Cloning Kit购自北京全式金生物有限公司，DNA回收试剂盒购自北京天根公司。

    1.2 方法

    1.2.1 AD169病毒感染HFF细胞：将1×105个HFF细胞铺于6孔板中 ......